红藤方对体外培养大鼠子宫内膜细胞生长特性影响.pdfVIP

红藤方对体外培养大鼠子宫内膜细胞生长特性影响.pdf

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2009 年8 月第26 卷第4 期 天 津 中 医 药 Aug. 2009, Vol.26 No.4 Tianjin Journal of Traditional Chinese Medicine 329 红藤方对体外培养的大鼠子宫内膜 * 细 胞 生 长 特 性 的 影 响 1 2 2, 2 3 刘津翚 ,张婷婷 ,束兰娣 戴德英 ,曹 霖 (1.天津市公安医院中医科,天津 300040;2.上海中医药大学附属曙光医院,上海 200021 ; 3.上海市计划生育科学研究所,上海 200032) 摘要:[ 目的] 探讨红藤方对大鼠子宫内膜细胞生长特性的影响。[方法] 选用SD 成熟雌性大鼠建立大鼠子宫内膜 细胞培养模型。用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度不同处理方式的红藤颗粒剂含药血清作用24、48 、72 和96 h 后 对大鼠子宫内膜细胞生长的影响,用达那唑含药培养液作阳性对照。 [结果] 不同浓度含药血清培养大鼠子宫内膜细 胞相应时间后,细胞的增殖活性随含药血清浓度升高而降低,呈明显的剂量依赖性,随作用时间延长而降低,具有明显 的时间依赖性。 [结论] 红藤方颗粒剂可显著抑制大鼠体外培养的内膜细胞的生长。 关键词:红藤方;细胞培养;血清药理学;含药血清;子宫内膜异位症 中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1672-1519(2009)04-0329-03 红藤方和达那唑是治疗子宫内膜异位症(EM , 鼠细胞角蛋白购自武汉博士德生物工程有限公司, 简称内异症)的有效药物之一。红藤方的前期诸多 Cell Counting Kit-8 (CCK-8)试剂为日本同仁化学研 整体动物实验表明该方可显著抑制子宫内膜生长, 究所惠赠,其余试剂均为国产分析纯。 有良好的活血清热、化瘀消癥作用,能抑制子宫内膜 红藤颗粒剂由上海中医药大学附属曙光医院中 生长;达那唑主要通过抑制下丘脑、垂体和卵巢功能 药制剂中心制备后冻干保存。达那唑由上海华联制 而发挥其治疗作用。研究通过建立大鼠子宫内膜腺 药有限公司生产(批号:020604)。 上皮细胞和间质细胞共培养模型,采用噻唑蓝 1.3 细胞培养 选用SD 成熟雌性大鼠。参考文 (MTT)比色法测定红藤方含药血清对内膜细胞生长 献[1] 中小鼠子宫内膜细胞培养方法,改良后建立大 的影响,并用阳性药物达那唑作为方法和药效的对 鼠子宫内膜细胞培养模型。大鼠剖腹后剪取两侧子 照,探讨红藤方治疗子宫内膜异位症的机制是否与 宫置于盛有磷酸盐缓冲液(PBS)的培养皿中,分离 抑制EM 发生的单元-细胞生长有关。 出内膜层,将子宫内膜置于盛有0.5% 胰酶和2.5% 1 材料与方法 胰蛋白酶的PBS 中,4 ℃消化1 h,室温消化1 h,其间 1.1 实验动物 健康成熟未交配过的清洁级雌性 每0.5 h 振荡 1 次,消化完成后将细胞移入2 mL 的 SD 大鼠,体质量200~220 g ,由上海计划生育科学研 培养液中,以台盼蓝(Trypan Blue)计算活细胞数,活 究所实验动物中心提供(合格证号:SCXK 沪2003- 细胞率>95% ,将细胞接种到24 孔无菌培养液或培 0002)。饲养条件:按清洁级动物要求饲养。经1 周 养瓶中,置于37 ℃ ,5%二氧化碳(CO )培养箱内培 2 适应性后开始实验。分为大鼠子宫内膜细胞培养模 养待用。 型组和血清药理学实验组两部分。 1.4 含药血清的制备 采用中药血清药理学研究 [2] 1.2 主要试剂 胰蛋白酶(Trypsin

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