在不同碳源培养条件下酿酒酵母蛋白质组解析.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’( )! *’ ) # 年 月 !$ % !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 +,- !$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 在不同碳源培养条件下酿酒酵母的蛋白质组解析 张慧敏 姚善泾 彭立凤 清水和幸 （浙江大学化学工程与生物工程学系，杭州 #/!0 ） 摘 要 为了分析酿酒酵母在不同培养条件下的代谢调控过程的差异，采用固相 梯度 聚丙烯酰胺双向凝 DE .FGF 胶电泳对其利用不同碳源时细胞的总蛋白进行了分离，银染显色，使用 蛋白质图像分析系统 !G H9,I3 +,;J3K !G 8(:J3 对双向电泳图谱进行分析，查询 蛋白质组数据库，识别了约 个蛋白质点。对与糖酵解途 FLHFF.!G MNO8 % 径、磷酸戊糖途径、三羧酸循环和几种回补反应相关的大部分关键的蛋白质进行了差异分析。探讨了酿酒酵母利 用不同碳源时及生长的不同阶段代谢机理的变化和在蛋白质水平的调控。 关键词 双向凝胶电泳，蛋白质组，代谢调控，酵母 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） P%/ N /.#1/ !$ #.#54.% 酿酒酵母作为一种重要的工业微生物，在生产 ，培养基为 ， ，碳 /R !IS R M’(-D3DJ’C /IS R T3,;J 37JK,J 实践和基础研究中有着广泛的应用。国外学者对研 源分别为 葡萄糖或 乳酸， ，培养温 !IS R %IS R DE % U 究酵母在不同的培养条件下代谢机理的变化取得了 度为# V ，搅拌转速#KS9:C，通气量为/URS9:C 。 很大的进展。随着蛋白质双向电泳技术（ ）不断 !# 检测方法 !G8 发展， 凝胶的分辨率越来越高，多种生物的蛋白 通过分光光度计（ ， ， ）测量发 !G WX3J.# Y,;’ 2’Z-’ ［，］ / ! 酵液在 处的光密度（ ）来测定菌浓度。再 质组图都已建立数据库