DEHP对大鼠卵巢凋亡基因和癌基因表达水平影响.pdfVIP

国家级继续医学教育项目(2014．12．04—005(国)) 第二部分：论文集 肿瘤，2007，1 6(7)：494—507． 【13]郑克非，孙全富．稳定性碘预防应用及其对我国核事故卫生应急准备工作启示【J]．中国 职业医学，2013，40(3)：270—272． DEHP对大鼠卵巢凋亡基因和癌基因表达水平的影响 徐新云，谭琴，秦逍云，吴德生，杨细飞，黄海燕，周丽，黄新凤 1．广东省深堋市疾病预碗控锄中心．广东深堋518055 o 2．深蜘大学生命科学学院．广东深堋518060 【摘要】目的：探讨邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)对大鼠卵巢组织凋亡基因和癌基因表 达水平的影响，为评价DEHP的雌性生殖毒性提供科学依据。方法：用不同剂量DEHP灌 胃染毒雌性SD大鼠6周，设对照组(玉米油)、低剂量组(100 mg／kg)、中剂量组(500mg／kg)、 500 高剂量组(1 caspase一9表达水平随DEHP染毒剂量升高呈上升趋势，与对照组比较显著升高，差异有统 粒体途径激活caspase通路诱导卵巢细胞凋亡，进而损害雌性动物卵巢功能和生殖内分泌功 能。且DEHP可激活原癌基因异常表达，具有一定的潜在致癌风险。 关键词：塑化剂：DEHP；生殖毒性；内分泌；凋亡基因；癌基因 为增塑剂(塑化剂)使用，添加到塑料中以增强弹性、透明度、耐用性和使用寿 命，它也可用来软化聚氯乙烯(PVC)。PAEs是使用最广泛、品种最多、产量最 大的增塑剂。儿童玩具、婴幼儿奶粉、女性香水、乳液、指甲油、护肤用品、药 物及营养补品的肠衣、医疗器械等产品中均有PAEs的使用。在塑料加工过程中， PAEs与塑料基质之间非共价键连接，随着时间的迁移，会从塑料中释放出来， J。 造成对土壤、水体、食物等广泛的污染，并通过生物富集和食物链侵入人体【l 人体血清[21、尿液[31、精液[41、羊水和母乳【5]中均可检测到PAEs及其代谢产物。 邻苯二甲酸二乙基己酯(di一2一ethylhexyl 现有体内和体外实验表明DEHP具有雌性生殖内分泌毒性【6】，雄性生殖内分泌毒 性f71，胚胎发育毒性[81，致突变作用【91，致癌作用【10】。本研究利用不同剂量DEHP 及癌基因表达情况，探讨DEHP对大鼠卵巢细胞凋亡的诱导作用，为DEHP具 有的潜在致癌风险提供一定的科学依据。 1．材料与方法 1．1实验动物 50％，12 h光暗循环条件下，饲料喂养，自由饮水及摄食。 1．2主要试剂和仪器 国家级继续医学教育项目(2014．12．04．oos(1雪)) 第二部分：论文集 TM Script RTMasterMix、SYBR⑧PremixEx RNaseH TaqTM(TliPlus)(中国TAKARA公司)； Biosystems)。 1．3动物分组与染毒 大鼠经适应性饲养1周后随机分为4组，即阴性对照组(玉米油)、低剂量 组(100 500 mg／kg)、中剂量组(500 mg／l(g)，每组10 mgg)和高剂量组(1 只。每天灌胃1次，每周5d，连续6周。 1．4荧光定量PCR检测凋亡基因和癌基因表达 动物染毒结束后摘取卵巢，．80℃低温冰箱保存。用刀片切取少量卵巢组织， 琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整。然后将RNA反转录为cDNA(所用试剂盒的来