白藜芦醇拮抗围绝经期抑郁模型小鼠行为异常与机制研究.pdfVIP

白藜芦醇拮抗围绝经期抑郁模型小鼠的 行为异常及机制研究 1, 2 1 1, 3 1 15* 陈纯白 ，都 霞 ，赵乐萍 ，王 林 ，潘建春 （1.温州医学院 药学院，浙江 温州，325035 ； 2.瑞安市人民医院 急诊科，浙江 温州，325200 ；3. 温州医学院附 属乐清医院 药剂科，浙江 温州，325600 ） [摘要] 目的: 探讨白藜芦醇对围绝经期抑郁模型小鼠抑郁样行为的拮抗作用及其可能机制。方法: 雌性 ICR 小 鼠 80 只，随机分为假手术组、手术组、手术应激组、手术应激+ 白藜芦醇组（15，30，60 mg·kg-1·d-1 ）、手术应激+ 丙咪嗪组、手术应激+17β-雌二醇组。采用去卵巢法建立围绝经期模型，再通过慢性应激建立抑郁模型，各组连续给 药 3 周。通过强迫游泳实验和开野实验观察各组小鼠的行为学改变，采用免疫组化法检测海马脑区 BDNF 和 Bcl-2 蛋白表达，检测脑内 SOD 活性、GSH 和 MDA 的含量。结果: 与手术组比，手术应激组小鼠在强迫游泳实验中的不 动时间明显延长，开野实验中水平活动和竖直活动均下降，海马脑区 BDNF 和 Bcl-2 蛋白阳性表达明显减少，脑组 织中 SOD 活性下降，GSH 含量降低，而 MDA 含量升高。白藜芦醇（30 mg·kg-1·d-1 或 60 mg·kg-1·d-1 ）能明显改善小 鼠抑郁样行为的异常，增加海马BDNF 和 Bcl-2 蛋白的阳性表达，显著提高 SOD 活性、增加 GSH 含量、减少 MDA 含量。结论: 白藜芦醇能拮抗围绝经期抑郁模型小鼠的行为异常，其机制可能与增加海马神经保护性蛋白 BDNF 和 Bcl-2 的表达及抗氧化作用有关。 [关键词] 白藜芦醇；围绝经期抑郁；脑源性神经营养因子；抗凋亡因子-2 ；神经保护；抗氧化 围绝经期是指从卵巢功能紊乱到绝经后 1 年，可历时 20 年（约 40~60 岁）。围绝经期抑郁症是 抑郁症中的一种类型，发病率约占更年期人群的 6%，占更年期综合症的 78%，以焦虑和情绪持续性 低落为主要特征的心境障碍性疾病。现代医学对围绝经期抑郁的治疗主要有激素替代疗法[1]及采用 激素替代和抗抑郁药联合[2] 的方法。但由于激素和现有的抗抑郁药物长期使用副作用较大，所以， 研究和开发新型、高效、低毒副作用的治疗围绝经期抑郁症的药物具有重要的临床和社会意义。 白藜芦醇（3,5,4′-trihydroxysitlbene，resveratrol ）是一种天然多酚类化合物，主要存在于虎杖、 决明、藜芦、葡萄等植物中，具有广泛的药理学作用，如改善学习记忆、抗炎、抗氧化及神经保护 等[3,4]，此外还具有植物雌激素样作用。前期研究发现，白藜芦醇在小鼠行为绝望模型中显示出明显 的抗抑郁活性[5] ，但其对围绝经期抑郁是否具有拮抗作用还未见报道。因此，本研究采用卵巢摘除 术，联合慢性应激建立围绝经期抑郁模型，观察白藜芦醇对围绝经期抑郁模型小鼠行为学的影响， 并探讨其可能的作用机制。 1 材料 1.1 实验动物 采用雌性 ICR 小鼠 80 只，体重（24 ±1）g，由浙江省实验动物中心提供，合格证号： SCXK （浙）2003-0001 。饲养条件：5 只/笼，室温（22 ±1）℃，湿度（50 ±10）％，自然光照，自 由摄食饮水。所有动物于饲养环境中适应5 d 后开始实验。 1.2 药品及试剂 白藜芦醇、丙咪嗪、17β-雌二醇均购自美国 Sigma 公司。超氧化物歧化酶（SOD） 测试盒、谷胱甘肽（GSH ）测试盒、微量丙二醛（MDA ）测试盒（南京建成生物工程研究所）；BDNF/Bcl-2 兔抗人、大鼠、小鼠多克隆抗体（sc-20981, sc-492, Santa Cruz, USA）兔多抗IgG ；PV-6001 兔二步 法检测试剂盒、DAB 显色试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司）。白藜芦醇用 0.5%羧甲基纤 维素钠溶解，丙咪嗪用双蒸水溶解，17β-雌二醇用花生油溶解。预实验中，0.5%羧甲基纤维素钠、 花生油和双蒸水三种溶剂对小鼠行为学结果的影响没有明显差异。因此，正式实验选择 0.5%羧甲基 纤维素钠作为空白对照。 1.3 主要仪器 小鼠强迫游泳