细菌酒精发酵的研究现状综述.docVIP

细菌酒精发酵现状 摘要：假单胞菌属的一些细菌与酵母菌酒精发酵的途径不同，即按ED途径进行酒精发酵。运动发酵单胞菌（z. mobilis）是20世纪70年代以来作为可能代替酵母进行酒精发酵菌种而广泛研究的对象。于酵母菌相比有其优势：发酵温度比酵母菌高，对糖的发酵速度及利用率均高于酵母菌，可提高生产周期和原料利用率，且发酵不需通气，设备较简单，有利于连续发酵、无载体固定化等先进工艺来降低成本。运动发酵单胞菌要求的发酵pH 较高,在6. 5左右。 关键词：细菌，发酵，酒精 研究方向：菌种的改良，通过诱变或基因工程选育优良菌株。 工艺的研究，间歇式发酵，连续式发酵，混合发酵。 工艺控制的研究，温度，PH值，底物浓度，酒精浓度。 底物的研究，薯干，玉米，高粱，大米等。 1。菌种的选育与改良 运动发酵单胞耐酸菌株的诱变筛选。 a.原始菌种: Zymomonas mobilis ATCC 31821 ,由江南大学生物工程学院生物资源研究室保藏.，通过酸性平板筛选,在实验室保藏的运动发酵单胞菌中,得到一株能在pH 4. 5时进行酒精发酵的菌株,其酒精产量为66. 7 g/ L ,与原菌株在pH 6. 5 时的相同. 通过单因素实验和正交实验,对该菌在酸性条件下的酒精发酵条件进行了优化. 结果表明,在发酵温度为30～35 ℃, pH 4. 5 , 初糖质量浓度150 g/ L , 酵母膏质量浓度4 g/ L , 蛋白胨质量浓度为2 g/ L 时,该菌的酒精产量达到最大,为71. 7 g/ L。 b. pH对乙醇发酵影响很大，运动发酵单胞菌虽然可以在较低的pH值条件下发酵,但只能耐受4. 5左右的pH,在pH为6. 5时发酵易受杂菌污染. 因此,酸性环境下的无高温灭菌发酵成为细菌酒精发酵工业化的一个障碍. 如果采用耐酸性细菌,可在糖化醪制备完成后直接用于发酵,而无需调节pH,既降低了成本又简化了工艺,为细菌酒精发酵的工业化奠定基础。 通过对运动发酵单胞菌原始菌株(ZM6)的耐酸驯化、紫外诱变、小型初筛和复筛,获得一株耐酸突变菌株ZM62322.，通过突变菌株与出发菌株以及酵母发酵性能的比较表明ZM62322的发酵蔗汁性能显著优于ZM6菌株和工业生产乙醇的酵母,其最终乙醇质量浓度为56. 64g·L - 1 ,比ZM6菌株的52. 18 g·L - 1提高了4. 46 g·L - 1 ,而且最终乙醇质量浓度、总糖出酒率、总糖利用率均比酵母高出约10%. 通过正交试验对该耐酸菌株的发酵培养基进行优化并进行验证,发现含250 g·L - 1总糖、10 g·L - 1酵母膏、2 g·L - 1 KH2 PO4、0. 5 g·L - 1 (NH4 ) 2 SO4、1 g·L - 1MgSO4 ·7H2O, pH 5. 5的培养基最有利于ZM62322的发酵,发酵时间短,产乙醇多.。 c,把地衣型芽孢杆菌淀粉酶基因，糖化酶基因克隆进PKT210并于质粒PGN86结合再导入运动发酵单细菌，就可使其直接利用淀粉了。 2. 发酵工艺及条件研究 A.将生产上常用的糖化菌（Ａｓｐ．ｎｉｇｅｒ３．４３０９）与酒精产生菌（Ｚ．ｍｏｂｉｌｉｓ）共同固定在海藻酸钙凝胶中，以淀粉为原料进行固定化细胞酒精发酵实验，当ＰＨ为５．０～５．５，温度为３０～３３时乙醇产率最高（Ｙｐ／ｓ可达０．３９）。而淀粉浓度、通气量对共固定化细胞酒精发酵有显著影响，二者存在着较强的交互作用，在发酵过程中根据淀粉粘度情况调节通气量将有助于提高乙醇产率。酒精生产过程中,产生了大量的酒糟废液。若不进行适当处理,将会对环境造成严重的污染。研究了酒糟直接回流、酒糟滤液回流和酒糟离心回流的情况以及不同的营养组合对细菌酒精全回流发酵的影响。结果表明:过滤后的酒糟废液,代替原来的拌料用水,循环用于酒精生产,可以实现酒糟的全回流。在回流发酵进行了八批后,酒精产量稳定在67.1 g/L以上,比没有回流时的65.2 g/L略有提高。而且在回流中,并不需要每次都添加氮源,这样可以减少发酵有害物质的积累,有利于实现酒糟滤液全回流。: Zymomonas mobilis ATCC 31821 （由江南大学生物工程学院生物资源研究室保藏.）,超过115 g/ L 的乙酸就会对细菌的发酵产生较强的抑制。当过多的酸扩散到细胞内部, 高浓度的H+ 增加了质子泵的负荷,由于细胞内部没有足够的ATP 水解酶和能量库,质子泵就不能完成运输大量H+ 的任务,这种平衡就会被破坏。最后的结果是,过多的酸使细胞质酸化,导致细胞受到抑制或引起细胞死亡。糠醛会发生氧化反应,形成了对酒精发酵抑制作用较小的物质呋喃乙酸,同时乙醛和甘油也会通过还原反应生成乙醇, 在较低的糠醛浓度(0～210g/ L) 时,糠醛可能阻止了酒精的氧化反应,而使酒精产