玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63活性组分制备及相关基因克隆研究.pdfVIP

摘要 玫瑰黄链霉菌Men．myco．93．63是一种分离自马铃薯疮痂病自然衰退土壤中的重 要生防菌，对黄瓜白粉病、棉花黄萎病等多种重要植物病害均有良好的防治效果。本 文对玫瑰黄链霉菌Men．myco。93．63的生物活性组分及其相关基因进行了研究。 发酵液可提纯获得172．2mg粗提抗生素，采用牛津杯法活性检测表明对棉花黄萎病 菌、马铃薯疮痂病菌抑菌活性稳定。定量测定表明马铃薯疮痂病菌最敏感，0．3m∥ml 粗提抗生素即可完全抑制其生长；粗提抗生素对变铅青链霉菌(TK24和TK54)的 抑菌活性较低。薄层分析表明甲醇：氯仿为1：6时是粗提抗生素薄层层析的最佳展开条 件，可分离出7个组分，其中组分Ⅲ、Ⅳ、Ⅶ对马铃薯疮痂病菌具有抑菌活性，组分 Ⅶ还对棉花黄萎病菌有抑菌活性。抗生素组分IⅡ对马铃薯疮痂病菌的抑菌活性最强。 采用制备型薄层硅胶板对抗生素组分m进行了大量制备，TLc和HPLc分析表明薄 层分离制备的抗生素组分ⅡI纯度较高，紫外光谱最大吸收波长为198．1nm和274．5nm， 与先前用HPLc制备的组分13近似。 玫瑰黄链霉菌Men．myco．93．63对自身抗生素组分ⅡI具有较高的耐受性，因而其 基因组中有相应的抗性基因。采用鸟枪法基因克隆技术在变铅青链霉菌中克隆了玫