DeltaPak填料用于P44纯化制备工艺可行性的研究.pdfVIP

第22卷第 10期 第 竺 军 医 大 学 学 报 Vol.22,No.10 2000年 10月 ACrA ACADEM IAE MEDICINAE M II1FAHLS 1FRTIAE Oct.2000 969 文章编号:1000-5404(2000)10-0969-03 DeltaPakC,:填料用于P44纯化制备工艺可行性研究 周 伟，吴玉章，王祥智，边 疆，贾正才 第〔三军K大学基础医学部全军免疫学研究所，重庆400038) 提 要:目的 研究DeltaPakC,:反相填料用丁P44纯化制备工艺可行性，为固相合成疏水性肤苗的制 备工艺作探索性研究。方法 选用美国Waters公司DeltaPakC,，反权色谱填料和高压液相色谱系统Delta 600，采用乙睛、三氟乙酸体系为流动相，对P44从分析柱、半制备柱、径向加压制备柱3个水平进行了基线分 离载量及放大的研究。结果 目标肤峰面积积分分别为71.14%,70.12%,69.68%，收率放大前后趋一致， 载量分别为100Ng,5mg,J0rng,制备目标肤收峰经SJ- yC.柱分析及PDA纯度鉴定为单一组分。结 论 该填料可作为P料的小量精制，用作放大制备其载量尚不能满足需要。 ， 关健词:DeltaPakC反相填料，P44，载量，放大系数 巾困诀仆举导 R192-33 ’ 女献坛识码一A FeasibilityofDeltaPakC,$stuffinP44prep ZHOUWei,WUYu-zhang,WANGXiang-zhi,BIANJiang,JIAZheng-cai(InstituteofImmunologyPLA,ThirdmilitaryMedicalUni- versity,Chongging400038,China) Abstract:Objective TostudythefeasibilityofDeltaPakCsstuffinthepreparationofpurified P44.MethodsDeltaPakCisstuffandhigh-perfonnanceliquidchromatography(HPLC)wereemployed toseparatedP44inanalysis,semi-prep,andpreplevels.Results Aimpeptidepeakareaintegrates were71.14%，70.12%and69.68%.Thesampleloadmasseswere100jig,5mgand10mgre- spectively.TheaimpeptidewasconfirmedtobepurifiedwithPDAdetect.Conclusion Ourfindings suggestthatDeltaPakCsstuffcanbeusedinlaboratoryprepforP44. Keywords:DeltaPakC,estuff;P44;loadmass;scale-upfactor 固相合成多肤的纯化制备通常采用反相色谱的方 1 材料与方法 法。C,8填料作为首先考虑对象而被运用;色谱方法则 以乙睛、三氟乙酸体系为流动相的梯度方法最具代 1.1 色谱柱 表川。经Fmot法固相合成的P44为一种疏水性极强 DeltaPakC,s5tun10043.9x150nnn分析柱(美国Waters 的多肤，疫苗分子设计在重点考虑肤苗免疫原性的同 公司)，DeltaPakC,d15tunIOOA19x300nun半制备柱(美国Wa- 时，其被色谱分离纯化的难度也随之加大。早有报道 tern公PI),DeltaPakPrepC,e15mIOOA2x300nun径向加压 以反相色谱的方法用于纯化小的强疏水肤，而对于氨 柱(美国Waters公司).SymmetryC,a5tunIOOA3.9x150uun分 基酸残基数目大于