实验四 血凝和血凝抑制试验20131025.pptVIP

一、实验目的 掌握血凝和血凝抑制试验的原理和操作方法，能够正确判定试验结果 二、血凝试验(Hemagglutination test, HA） 原 理 病毒粒子上的血凝素蛋白与特定红细胞 (red blood cell, RBC)表面相应受体结合，引起RBC凝集. 试验材料 鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV) 鸡红细胞(RBC)： 采集健康鸡血液，以阿氏液抗凝，用生理盐水洗涤3-5次，将血浆、白细胞等充分洗去，用生理盐水配成1%红细胞悬液备用 生理盐水（0.85% NaCl） 96孔U型微量反应板、微量移液器、灭菌塑料吸头 操作步骤 在血凝板第一排的1-12孔加入50μl生理盐水。 在第1孔中加入50μl病毒，混匀后吸50μl到第2孔，如此倍比稀释直到第10孔，混匀后弃50μl；最后两孔（11、12）为红细胞对照。 将1%的红细胞轻轻摇动混匀，在1-12孔中每孔加入50μl。 手工震荡，室温静置20~30min后观察结果 试验材料 4个血凝单位鸡新城疫病毒(如何配置?) 鸡红细胞(RBC) 被检血清 (被检鸡的血清) 生理盐水（0.85%） 96孔U型微量反应板、微量移液器、灭菌塑料吸头 操作步骤 在血凝板的1-12孔加入25μl生理盐水。 第1孔加入待检血清25μl，混匀后吸25μl至第2孔，倍比稀释直至第10孔，混匀后弃25μ