工业微生物育种技术研究进展.pdfVIP

维普资讯 第 32卷 第 2期 内蒙古师范大学学报 自然科学 (汉文)版 Vo1．32No．2 2003年 6月 JournalofInnerMongoliaNormalUnivm~ty(NaturalSciemceEdition) Jun．2003 工业微生物育种技术研究进展 房耀维，范 琳 ，牛艳芳，张 功 (内蒙古师范大学 生物系，内蒙古 呼和浩特 010022) 摘 要：工业微生物育种是运用遗传学原理和技术对某种具有特定生产 目的的菌株进行改造 ，去除 不 良性质 ，增加有益新性状 ，以提高产品的产量和质量的一种育种方法．工业微生物的育种技术 已从常规 的突变和筛选技术发展到基因诱变、基因重组和基因工程等 ，育种技术的不断成熟 ，大大提高了微生物的 育种效果． 关键词 ：工业微生物育种；诱变育种 ；基因重组育种 ；基因工程育种 中图分类号 ：Q3一O5 文献标识码 ：A 文章编号：1001—8735(2003)02—0158一O4 1 常规育种 常规育种是以自然突变为基础 ，从中筛选出具有优 良性状菌株的一种育种方法．一般情况下，由于 DNA的半保留复制以及校正酶系的校正作用和光修复、切除修复、重组修复、诱导修复等作用，发生 自 然突变的几率特别低，一般为 10 ～10-10／BP，而且用于工业生产的菌株的性状往往 由单一或少数基 因控制，所以常规育种时间较长，工作量较大．曾在大肠杆菌 (EscherichiaColi)中分离到一系列增变基 因，主要有DNDE、MUTD、MI T、DAM、MUTM、MUTH、MUTI、MUTS等uJ，含有这类增变基 因的 茵类突变相对较高．富集法筛选技术的不断完善与改进，使常规育种效率有所提高，但选育效果较其他 育种方法还是很低 ． 2 诱变育种 1927年MILLER发现 X_射线能诱发果蝇基因突变．之后人们发现其他一些因素也能诱导基因突 变，并逐渐弄清了一些诱变因素的机理 ，为工业微生物诱变育种提供了前提条件．根据育种需要 ，有 目的 地使用诱变因素，可使菌株的基因发生突变以改 良其生产性状． 目前，人们用于诱变育种的诱变因素有物理因素和化学因素，前者包括激光、X_射线、7一射线快中子 等．后者主要是烷化剂 (包括EMS、EI、NEU、NMU、DES、MNNG、NTG等)，天然碱基类似物，亚硝酸和 氯化锂．在物理诱变因素中，紫外线比较有效、适用、安全，其他几种射线都是电离性质的，具有穿透力， 使用时有一定的危险性．化学诱变剂的突变率通常要 比电离辐射的高，并且十分经济，但这些物质大多 是致癌剂，使用时必须十分谨慎．目前，多种诱变剂的诱变效果、作用时间、方法都已基本确定 ，人们可以 有 目的、有选择地使用各种诱变剂 ，以达到预期的育种效果． 诱变育种取得 了显著的效果，如青霉素生产茵的产量在 40年 内就增加 了300多倍 ，达到 6000～ 8900U·mL [；谷氨酸的生产菌株经紫外线诱变处理，发生了多方面的变异，产酸率提高了31％[3J， 茵体形态从典型的八字形变的长短不一，用电镜超薄切片观察其亚显微结构 ，发现细胞厚度及透光度发 生变化；用亚硝酸钠、紫外线等物化方法诱变产碱性蛋 白酶的地衣芽孢杆菌，使其从原来的以玉米粉为 收稿 日期：2002—08—18 基金项 目：内蒙古 自然科学基金贷助项 目(200208020313) 作者简介：房耀维(1978一)，男，内蒙古赤峰市人，内蒙古师范大学在读硕士研究生 维普资讯 第2期 房耀维 等：工业微生物育种技术研究进展 ·159 · 碳源转变为以大米为碳源进行发酵产酶，后用紫外线辐射进行诱变，最终筛选 出F一8014菌株，产酶量 提高了37％[41．目前 ，人们致力于探索获得新的优 良突变种的有效途径，如研究新的诱变剂，比较各种 诱变剂混合使用的影响与效果，寻找高效的筛选方法等．离子束诱变育种始于 1996年，是根据氨基酸及 核酸的生物合成途