超临界流体萃取和气相色谱／质谱法测定中国茶中咖啡因含量.pdfVIP

超临界流体萃取和气相色谱／质谱法测定中国茶中咖啡因含量 邱涤非 肖晓瑶 李 东* 湖（南大学化学化工系 长沙 410082） 湖南大学环境工程系 长沙 410082） 提要 运用超临界流体萃取方法和气相色谱／质谱法联用，成功地测定了三种中国茶叶中咖啡因的含量。方法 简便，灵敏度高，测定速度快。平均回收率为98.1%。 关键词 气相色谱／质谱法，超临界流体萃取，咖啡因，中国茶 按以上条件萃取4次，然后将收集器洗涤两次， 1 前言 整个控制过程均在微机Windows下自动操作。萃取 茶叶中咖啡因的含量是衡量茶叶质量的一个重 出的样品收集起来后，在常温下用N2气吹干，再用 要指标，人们通过各种方法来测定[，2]。特别是色谱 甲醇溶液配至2mL，放入约5℃的冰箱中备用。 的使用，使得测定工作在灵敏度和速度上有了极大 2.3 咖啡因的测定 的提高[3，4。然而咖啡因的萃取多停留在常规萃取。 2.3.1 色谱条件 载气为He，流速36mL/min，进 而常规萃取周期长，同时使用大量醚类或醇类试剂， 样温度280 ，溶剂保留时间3min，起始温度150 ， 给快速测定带来一定的困难，也给环境带来污染。我 程升速率20 /min，终点温度280 。进样方式为不 们采用超临界流体CO2萃取 s（upercriticalfluidex- 分流进样 柱（前开闭阀时间为0.75min。 traction，简称SFE）和气相色谱-质谱联用，成功地 2.3.2 质谱条件 极化电压70eV，质量范围50～ 测定了三种中国茶叶中咖啡因的含量。 600，测量方式CI测量温度280 ，以扫描方式进行 记录 。 2 实验部分 2.3.3 测定 用微量进样器吸取4L样品进样。标 2.1 仪器与试剂 准曲线以咖啡因4个主要质谱 1（941096755）峰丰 超临界流体萃取仪 美（国Hewlett-Packard公司 度之和，按ChemstationWindows内）软件中所定 HP7680A型），气相色谱-质谱仪 （美国Hewlett- 外标曲线法计算样品中的咖啡因含量。 Packard公司5985型）；DB-5毛细管色谱柱 0（.25m 3 结果与讨论 i.d. 25m 。 咖啡因：生化试剂，代号C-0750，美国Sigma化 3.1 萃取 学公司；甲醇 AR，英国Fisons公司；SFE担体：美 3.1.1 萃取率与萃取 次数 Hewlett-Packard 国Hewlett-Packard公司；CO2：Instrument-grade， 7680A型超临界流体萃取仪不能像常规萃取那样大 英国BOC公司；标准溶液：咖啡因甲醇溶液，贮备溶 量萃取。图1是3mg龙井茶的萃取率与萃取次数的关 液为188g/mL；工作溶液：18.8g/mL，配好后，放 系图。由图1中可看出增加萃取次数能大大改善萃取 入约5℃的冰箱内贮存备用。 率，而4次萃取己基本保证了完全萃取。 2.2 咖啡因的提取 3.1.2 萃取率与加水量 由于使用的超临界流体 准确称取一定量 在（1 3mg之间）磨碎的均匀 CO2是非极性的，所以添加了调节剂来增加萃取体 茶叶样品放入装有SFE担体的7.1mL萃取池中，加 系的极性。但咖啡因在甲醇溶液中溶解性较差，即使 水250mL，加甲醇200mL。萃取条件如下：流体压力 用CO2+10 CH3OH流动相，萃取率也并不理想， 329