高效液相色谱法测定枸杞叶中精胺和亚精胺.pdfVIP

第10卷第1期 宁夏工程技术 V01．10No．1 2011年3月 Mar．201l NingxiaEngineeringTechnology 文章编号：1671—7244(2011 JOI一0048—03 高效液相色谱法测定枸杞叶中精胺和亚精胺 马宝龙1，一， 屈旭斌1 (1．宁夏大学化学化工学院，宁夏银川750021；2．神华宁夏煤业集团有限责任公司，宁夏银川750011) 摘要：为了建立枸杞叶中精胺和亚精胺含量测定方法，对苯甲酰氯衍生精胺和亚精胺高效液相色谱法的分析条件 进行了探讨，提出了精胺和亚精胺色谱测定的优化条件．结果表明，在苯甲酰氯衍生荆用量7斗L，流动相矿(甲醇)： 精胺的回收率分剐为105．0％，95．9％，方法检测限分别为0．167，1．060nmoIAnL，标准偏差分别为6．7％，5．3％． 关键词：精胺；亚精胺；高效液相色谱法；衍生化 中图分类号：0657．72文献标志码：A 000 精胺(Spermine，Spm)和亚精胺(Spermidine，Spd)超声机，水浴锅，离心机(TDL80—2B，4r／rain)． 是多胺中的两个组分，是植物体内具有生理活性的 精胺(Spm)标准品，亚精胺(sod)标准品，苯甲 一类有机小分子物质，它们与植物的生长发育关系 酰氯、乙醚、甲醇均为色谱纯，NaOH、NaCI均为分析 密切，参与植物细胞分裂、DNA的凝聚及激素的调 纯，实验用水为一级纯． 控等111．当植物遭受水分胁迫、酸胁迫、盐胁迫、离子 1．2测定方法 胁迫和低温胁迫等各种逆境时，精胺和亚精胺合成 1．2．1精胺和亚精胺标准贮备液准确称取精胺和 8 8 酶活力增加，植物体内大量积累精胺和亚精胺类物 亚精胺标准品0．019 g和0．015g，用水溶解，分 质，其对稳定细胞膜、核酸及蛋白质等大分子物质的 别定容至10mL容量瓶，该贮备溶液含精胺和亚 mL 构象有重要的作用．精胺和亚精胺在人体内也大量 精胺皆为lmm01．／mL．准确移取上述两溶液1 存在，并与人类健康息息相关[21．食物是人体内精胺 于2个10mL容量瓶中，用水定容至刻度，作为标 和亚精胺的重要来源之一[31．由于精胺和亚精胺在生 准使用液． 物体中含量很低，因此发展选择性好、灵敏度高的检 1．2．2工作曲线的制作取精胺和亚精胺标准使用 测精胺和亚精胺的简便方法有着重要意义．精胺和 液各40此置于10mL带盖塑料离心管中，加入7乩 mL2mol／L 亚精胺属脂肪族直链胺类，以前主要用氨基酸分析 苯甲酰氯，再加入l NaOH，涡漩20s后 仪、纸电泳等方法测定[41，不仅样品回收率低而且检 在37℃水浴反应20min．加入2mL饱和NaCI溶 测灵敏度不高．目前提出用衍生化的方法，将精胺和 液，混匀后用2mL乙醚萃取于离心机上(1500如in) mL醚相于1 亚精胺的一、二级氨基接上对荧光或紫外有吸收的 离心5min后，取1 mL离心管中，在37℃ 基团，通过薄层或液相色谱法分离检测旧．然而该方 水浴下干燥．用100