华蟾素对乳腺癌细胞株MCF-7的杀伤作用研究.pdfVIP

中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletin 2011Jan；27(1)：37—41 ·37 · 华蟾素对乳腺癌细胞株MCF-7的杀伤作用研究 马丽娜 r，宋 兵 ，金 花 ，彭 元 ，蔡继业 (暨南大学 1．光电信息与传感技术重点实验室、2．化学系、3．组织移植与免疫实验中心，广东广州 510632) 中国图书分类号：R284．1；R329．24；R329．25；R737．902．2； 于中药不仅对肿瘤具有抑制作用，不易产生耐药性， R979．1 而且对机体的损伤和副作用也较小，因而研究中药 文献标识码：A 文章编号：1001—1978(2011)01—0037—05 抗肿瘤作用及其分子机制是我国科学工作者的重要 摘要 ：目的 研究华蟾素诱导人类乳腺癌 MCF-7细胞的凋 课题之一。华蟾素(cinobufacini)注射剂是我国的一 亡作用。方法 利用 CCK一8法检测华蟾素对乳腺癌 MCF-7 种传统的中药制剂，其主要成分是蟾毒灵及吲哚生 细胞的增殖抑制作用 ；用流式细胞术检测细胞的凋亡抑制 物碱等 J。华蟾素对多种人肿瘤细胞具有不同的 率；利用倒置荧光显微镜观察细胞整体形态的变化；利用原 抑制作用，其以安全有效、毒副作用小的优点而被广 子力显微镜(AFM)高分辨率、高灵敏度的特点，从纳米尺度 泛应用于临床。但其对肿瘤细胞的药物作用机制尚 上进一步观察细胞形貌及超微结构的变化。结果 CCK一8 结果显示 ，华蟾素对 MCF-7细胞的生长有明显的抑制作用 ， 不明确。本工作 旨在研究华蟾素诱导人乳腺癌 且随着剂量的增加 (6．25—50mg·L )而增大，当浓度为 MCF-7细胞凋亡作用 卜 ，为华蟾素应用于乳腺癌 50mg·L 时，抑制率达到 (68．40±1．02)％。采用流式细 的临床治疗提供新的依据。 胞术对细胞凋亡的检测结果也表明华蟾素浓度为50mg· 1 材料 L 时，细胞晚期凋亡率最大，可达到 (55．5±1．2)％。AFM 1．1 主要材料 乳腺癌 MCF一7细胞株购 自中科院 与对照组相比，药物作用后，细胞开始坍塌变矮、细胞变小， 上海生命科学研究院细胞资源中心，华蟾素注射剂 周围呈月牙状或环状 ，浓度最大时，细胞中间出现较大孔洞。 购 自安徽淮北金蟾药业总公司 (5ml／支，500mg／ 结论 华蟾素能有效抑制MCF-7细胞的生长增殖并诱导其 m1)，RPMI1640培养基购于Gibco公司，胎牛血清 凋亡。利用AFM在单细胞水平上分析华蟾素对 MCF-7细 购于四季青公司，CCK-8试剂盒购于碧云天公司， 胞的作用 ，使分析结果更加全面。 AnnexinV—FITC／PI凋亡试剂盒购 自南京凯基生物科 技有限公司，其它试剂均采用国产分析纯，实验室用 关键词：原子力显微镜；华蟾素；乳腺癌MCF-7细胞；细胞凋 水为超纯水 ，AutoProbeCPResearch型原子力显微 亡；超微结构；单细胞水平 ；高分辨率 镜血清购于四季青公司，CCK．8试剂盒购于碧云天 公司，AnnexinV．FITC／PI凋亡试剂盒购 自南京凯基 乳腺癌是全球第二高发的恶性肿瘤，特别是在 生物科技有限公司，其它试剂均采用国产分析纯，实 欧美发达国家，为女性中发病率最高的癌症