Agilent1100液相色谱基本使用方法.doc

基本操作： 开机：先打开电脑电源，然后开启液相各组件电源，boopt sever显示电脑与仪器联接的情况。（注：电脑与液相之间通过DAD上接口联接；若未连接上，在boopt sever打开的情况下，仅关开一次DAD即可联接成功），然后再打开“仪器1 联机”。 脱气：拧松purge阀（逆时针旋开2圈），在溶剂瓶中加入足够量的流动相，开泵，流速设为5ml/min约5分钟。（注：脱气时需单个进行，如脱A则设置A为100%，脱B则设B为100%；所需用到的流动相都须脱气） 溶剂过渡：以0.8ml/min 的流速用10%甲醇水，拧紧purge阀，跑至压力恒定不变，约10min。（过渡的作用是冲稀流路内的有机溶剂，使水的比例占搞使缓冲盐不易析出堵塞系统损坏色谱柱，当使用Na、K、磷酸盐等在有机溶剂中溶解度低的缓冲盐时，此步十分重要）（先将流速调低再拧紧purge阀） 跑基线：调用分析样品的方法跑基线，然后拧紧purge阀，以平衡柱子，约30min左右。（为延长检测器灯的寿命，可在跑基线20min后再开检测器电源，直接点开开关即可） 进样分析：将样品液过0.45um过滤器注入样品瓶，置于自动进样器样品盘上，设置序列（样品瓶位置，名称，分析方法，进样次数。其中后两者为必须的，缺一则报告错误，前两者非必须，当样品瓶位置空缺时只运行方法不进样；设置时将鼠标指针置于样品序列视图上，左键单击即可弹出对话框。） 洗柱：样品分析完毕，对于反相柱使用10%甲醇、100%甲醇各冲稀30min，最后柱子须充满100%甲醇保存。（洗柱方法：洗柱.M；使用洗柱方法时，最好设定自动关机。序列/序列参数/后运行：macro “shutdown .MAC”，go。也可以在样品序列上添加洗柱程序）。 关机：关闭电脑和仪器各组件电源。（关闭操作界面时要注意弹出对话框内容，关闭灯等）（先关闭电脑，然后再关闭液相各开关） 编辑完整方法 点击方法/编辑完整方法：点击确定 进入泵参数设置界面：设置流速、分析时间、溶剂比例 梯度洗脱设置： 点击确定进入进样器设置界面：设置进样方式，进样量。 设置柱温箱：柱温，停止时间设为“与泵一致” 设置检测器信号： DAD：设置样品检测波长、带宽、参比。检测波长一般选取该检测物质的最大吸收波长，参比选择该物质物吸收的波段。在存储 FLD 6．方法保存：点击文件/另存为/方法，输入方法名称。 编辑积分事件 点击图中所示快捷键进入积分界面， 点击积分/积分事件，进入积分编辑界面，或者点击上图积分界面的快捷键进入。 点击积分图标在基线最平处及峰的两边各点击一个点，所取点所对应的时间在界面左下角处会显示。若峰太小不易辨认峰的起始结束点可点击放大镜先将图放大到适合大小再取点。点击打勾的图标对积分事件进行保存。 点击文件/保存/方法，将积分事件保存到方法中。当方法中存在一个积分事件时，调出的相同信号都在同一处对峰进行积分。 校正曲线的制作 配置一定梯度的标准溶液，用方法进行进样分析 调出最低浓度的信号，对目标峰进行积分 点击校正，进入校正界面 点击校正/新建校正列表… 弹出对话框：在缺省含量里输入物质浓度 点击确定弹出下面对话框：点击是。此时建立了校正曲线的第一个点。 删除除目标峰出峰时间以外的信号点：选择后按Delete键或者按删除 建立第二个点：调出第二个浓度的信号，点击校正/添加级别…，输入浓度，点击确定，即建立了第二个点 按照以上方法依次建立第3、4、5……点 校正的一些快捷键 点击文件/保存/方法。将校正曲线保存 方法检测限的计算 点击报告/系统适应性/编辑噪声范围，设定计算基线噪音的范围（取曲线最平的那一段或峰的左右两边平整段）。输入后点击确定 点击报告/设定报告：在报告格式选框中选择“性能报告+噪声报告”，确定 点击报告/打印报告，弹出报告框 按照检测限定义，取3倍信噪比时的浓度。 9 新建校正列表 添加级别