人体食管组织中终隔细胞的形态学及相关的研究.pdf

博士论文 中文摘要 人体食管组织中终隔细胞的形态学及相关 研究 中文蒴葵 种器官和组织中均存在这类细胞，大量的动物实验表明此类细胞与组织、器官的 运动、血供、免疫、损伤修复、组织再生等重要活动相关。然而终隔细胞在人体 中的相关研究并不完善。一些研究显示终隔细胞存在于人心肌、人子宫及输卵管、 胎盘组织、泌尿道、骨骼肌、肺脏、乳腺及胰腺外分泌部。终隔细胞定位于这些 器官的结缔组织内，与其他特殊类型的细胞相互关联，如内皮细胞、肌纤维、神 经细胞终端、干细胞或免疫细胞。这些研究均以形态学层面的研究为主，终隔细 胞在人体中的生理作用相对而言知之甚少，而对于食管、胸腺、皮肤等器官组织 中终隔细胞的研究尚未见报导。那么在这些组织中是否存在终隔细胞，若存在， 它的生理学作用是什么，有没有参与某些疾病的调控?我们选取正常人食管组织 为研究对象，利用透射电子显微镜技术及免疫组织化学方法从形态学的角度原位 观察终隔细胞是否存在；同时利用原代细胞培养及活细胞染色技术分离并原代培 养终隔细胞，以寻找以上问题的解答。 我们从接受手术的食管疾病患者切除的组织中获得10份人食管标本(已通 过中山伦理委员会审核，患者知情同意书已签署)，并经高年资病理医生确认为 正常食管组织。每份组织均分为3份：新鲜组织一份(约lmm3)用于透射电子 显微镜(TEM)观察；福尔马林预制一份，用于HE切片染色及免疫组织化学法 染色观察；新鲜组织一份(无菌)用于原代终隔细胞分离，体外培养。 透射电子显微镜检查。小块的新鲜组织采取后立即投入4％戊二醛溶液，经 过固定、脱水、浸透、包埋、聚合等预处理后，利用超微切片机制备成50rim的 薄片，透射电子显微镜下观察并拍照。我们发现，在食管的肌层及粘膜层均存在 典型的终隔细胞，形态学上表现为较小的胞体，延伸出2．3支十分长而分叉的附 及其上膨起的颗粒状节段(podoms)组成。同时我们观察到这些终隔细胞与人 食管中的巨噬细胞、平滑肌细胞及毛细血管关系密切，邻近的终隔细胞之间尚见 博士论文 到多支端支蜷曲形成迷宫样的网状结构。 免疫组织化学法染色。福尔马林预制人食管组织圳 理后，经HE染色确认为食管组织。进一步经c—kit、v 化学法处理，光学显微镜下观察发现典型的终隔细胞， 阳性。 原代终隔细胞分离，体外培养，相差显微镜观察。 食管标本，经粉碎、消化、离心、重悬等处理得到原竹 胞培养技术进行体外培养。体外培养第三天起，反转耗 隔细胞及其典型的长而呈念珠状的端支。通常4天左右 原代终隔细胞。为了更清楚的显示终隔细胞的形态学鬟 的细胞活体染色技术。亚甲蓝及吉姆萨染色后，可见1 其细长的附属端支类似一串玻璃小珠，从胞体发出的孝 些特点与树突状细胞、成纤维细胞或成肌纤维细胞明与 的亲线粒体染色剂。健那绿染色后观察到终隔细胞l (podoms)染色明显。 终隔细胞是一种存在于结缔组织中的间质细胞，上 细胞、免疫细胞等关系密切。本研究证明了人食管肌层 终隔细胞，且与毛细血管、平滑肌纤维、巨噬细胞关署 胞之间通过端支形成迷宫样的网状结构。我们的试验溜 细胞功能的假说的直接证据。但是基于以上形态学研箩 其他问质细胞以及终隔细胞之间通过端支形成三维立，c 织的机械支持，我们认为终隔细胞对免疫作用、细胞问 作用。考虑到其与毛细血管及肌细胞关系密切，终隔细 中也可能存在功用。一些与平滑肌功能、组织损伤修轰 博士论文 英文摘要 The andrelative Studiesof Telo an esophagus Abstract Asanovelofinterstitial were as type cells，telocytes consideredinterstitial initially