前列腺癌PC3细胞中恢复Nkx3.1表达提高17β-雌二醇抗肿瘤作用.pdfVIP

第 34卷第 6期 健 康 研 究 Vo1．34 NO．6 2014年 12月 HealthResearch Dec．20l4 doi：10．3969／j．issn．1674—6449．2014．06．006 前列腺癌 PC3细胞 中恢复Nkx3．1表达 提高 17I3；一雌二醇抗肿瘤作用 陈 军 ，王 平 ，陈昭典 (浙江大学医学院附属第一医院 泌尿外科 ，浙江 杭州 310003) 摘要 ：目的 调查恢复同源转录因子 Nkx3．1在前列腺癌 PC3细胞 中表达可否提高 l7B一雌二醇抗肿瘤作用。方法 构建 Nkx3．1真核表达质粒 pcDNA3．1一Nkx3．1一His，转染 PC3细胞获得稳定表达 Nkx3．1细胞系 。MTT分析 Nkx3．1对 PC3细胞增殖影响 。进一步通过 MTT分析细胞增殖 、流式细胞仪分析细胞凋亡来验证恢复 PC3细胞 Nkx3．1是否可提高 17一雌二醇抗肿瘤作用 。此外，Westernblot分析在 PC3细胞 中单独使用 17B一雌二醇或结合 Nkx3．1对凋亡相关蛋 白表达影响 。结果 Nkx3．1真核表达质粒在 PC3细胞 中获得高表达 。外源性 Nkx3．1表达 对 PC3细胞增殖无 明显影 响，但可明显提高 17B-雌二醇抗增殖作用及诱导细胞凋亡 。进一步分析凋亡相关蛋 白表 达显示 ，结合 Nkx3．1与 17B一雌二醇可使 bcl一2表达下降、bax表达升高、caspase一3激活、PARP劈裂片段增加 。结论 恢复 PC3细胞 Nkx3．1表达可 明显提高 17B一雌二醇抗肿瘤作用 ，提示在雌激素治疗激素抵抗前列腺癌 中恢复 Nkx3．1表达是一值得尝试方法。 关键词 ：Nkx3．1；雌激素 ；凋亡 ；前列腺癌 中图分类号 ：R73—3 文献标识码 ：A 文章编号 ：1674—6449(2014)06—0615—04 Enhancing1713-estradiol’Santi—tumorcapacitybyrestoringthe expressionofNkx3．1inPC3prostatecancercells CHEN Jun，WANG Ping，CHEN Zhao—dian (DepartmentofUrology，theFirstAffiliateHospital，MedicalCollegeofZhejiangUniversity，Hangzhou310003，China) Abstract：ObjectiveTotestthehypothesisthattheanti—tumorcapacityof17B—estradiolcanbeenhancedbyrestoringthe expression ofthehomeodomain transcription factorNkx3．1in PC3 human prostatecancerceils．M ethodsPC3 cellswere stablytransfectedwithpeDNA3．1一Nkx3．1一Hisvectorwhich carriesafull—length cDNA ofhumanNkx3．1．ThePC3cells stably transfectedwithvectorpcDNA3．1weresetascontro1．TheexpressionofNkx3．1proteinintheceilswasconfirmedby westernblotanalysis．TheeffectofNkx3．1oncellproliferationofPC3cellswereexaminedwithMTT assay．Thentheanti— proliferativeandapoptoticeffectso