芪榔合剂对慢传输型便秘小鼠结肠Cajal间质细胞的影响.pdfVIP

(注：给药15天，实验过程中，每七天小鼠称重一次，并做记录。给药过程中共死亡5只小 鼠(阴性对照组1只，大剂量中药组1只，小剂量中药组4只)，分析死亡原因为：灌胃至胃穿孔、 便秘至肠梗阻腹胀难以进食而死；因实验室线路改造当中停电4h左右，致使热闷、憋胀而死。另 前期预初实验，无此类事件发生，死亡较少。) 2．3主要关察指标 ①小鼠首次排便时间；8h排便总数；不排便动物数；20h排便总数。②小鼠小肠炭末推进率。 ③小鼠结肠can细胞结构。④小鼠结肠c—kit阳性表达。⑤小鼠结肠c—kitmRNA表达． 2．4统计学处理 ANOVA检验．P0．05为有统计学意义。 用one-way 3结果 3．1小鼠首次排便时间，8h排便总数、不排便小鼠数，20h排便总数便秘组与阴性组比较首 次排便时间明显延长，8h、20h排便总数明显减少，8h不排便动物数明显增多；大小剂量中药组与 便秘组比较，首次排便时间明显缩短，8h、20h排便总数明显增多，说明大小剂量中药组均都有较 好的通便效果；见下表l。 表l芪榔合剂对便秘小鼠排便影响(孑士SD) 注：·与阴性组比较P0．05；撑与便秘组比较P0．05。 3．2小鼠小肠炭末推进率 便秘组与阴性组比较小肠炭末推进率明显降低(JP0．05)．大小剂量中药组与便秘组比较小肠 炭末推进率明显升高(户0．05)，说明芪榔合剂能够较好的促进肠道运动；大小剂量中药组与阴性 对照组比较仍有一定差距．说明芪榔合剂有改善便秘作用。见下表2． 表2炭末推进率(％) 注：·与阴性组比较P0．05．撑与便秘组比较P0．05。 3．3小鼠结肠CaN问质细胞结构 便秘组与阴性组比较CaN问质细胞出现基膜溶解，数量减少。其与周围细胞之间的紧密连接也被 破坏，细胞核有不同程度萎缩。大小剂量中药组与便秘组比较其CaN间质细胞数量增加。如图l。 ·371· A阴性组 B便秘组 C大剂量中药组 D小剂量中药组 3．4小鼠结肠c-kit阳性表达 从四组中每组随机选取四个标本进行免疫组织抗体标记实验，每个标本同样选取300个细胞为 基数，然后查取其抗体蛋白标记细胞(黄色或浅深色)，阳性率即为标记阳性细胞除去300乘以 100％。便秘组远端结肠c-Kit阳性细胞数较阴性组明显减少，大小剂量中药组较便秘组远端结肠 c-Kit阳性细胞数显著增加．但尚未达到阴性组水平。见表3。 寰3各组免疫组化阳性率比较(％ 05，C组与D组比P0．05． 注：C组与B组比较P005．D组与B组比较P0 3．5小鼠结肠c--kitroRNA表达。 秘组较阴性组小鼠近端结肠组织免疫组化c-kit阳性细胞显著减少(P0．0I)．太小剂量中药组较便秘组 裹4各组mRNA阳性率比较(％) 4讨论 ·372 慢性传输型便秘的发生机制尚不完全明确，但是随着分子生物学不断发展，逐渐发现cajal (interstitialcells Ice)问质细胞是存在于胃肠道的一种特殊的间质细胞。ICC表面可以表 ofCaja_l 达多种蛋白，其中最为重要的是酪氨酸激酶受体c-kit。Cajal问质细胞作为胃肠道运动自主节律性 起搏细胞和兴奋传导细胞，具有产生慢波和传导兴奋，参与神经递质调节作用．目前认为C@al间 质细胞与慢性传输型便秘的产生具有极其密切关系。 慢性传输型便秘属中医“便秘”范畴。其形成多由于久坐、久卧耗气，推动乏力；或素体亏虚， 或脾胃虚弱，饮食厚味等致使津液分泌缺乏，导致肠中糟粕干枯，乏水行舟而致便秘，即我们所谓 胃肠动力不足。故其病机为气阴两虚，肠道气滞，腑气不通。以此理论为指导，我科创制通便方“芪 榔合剂”，其组成：黄芪、槟榔、知母、玉竹、枳实、全瓜萎、望江南七味中药，共奏益气养阴， 行气导滞之功效。现代研究发现，黄芪、槟榔可使胃肠平滑机张力升高，蠕动增加