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二、大型实验动物在生物医药研究中的应用 303
型猪为实验对象,对其血液、生理、生化指标进行了测定,并与普通巴马小型猪进行比较,为克隆猪安全
性评估及其产业化健康发展提供参考依据。
1材料与方法
1.1实验动物
体细胞克隆巴马小型猪是利用优良品种巴马小型猪(巴马香猪)体细胞作为核供体,体外成熟的猪卵
母细胞作为受体,经去核、融合和激活构建得到早期克隆胚胎,然后植入代孕母体一长上母猪(长白公猪
配上海白母猪)体内,经正常妊娠(114d)产下体细胞克隆巴马小型猪。
本试验选取4头雄性的体细胞克隆巴马小型猪为实验对象,相同月龄(1.5和3.5月龄)的lO头雄性
普通巴马小型猪为对照组。巴马小型猪均由上海市农业科学院畜牧试验场提供[SCXK(沪)2010·00251。
1.2血样采集
采用耳静脉采血法。由猪的耳静脉采血分装在两个一次性自动定量静脉采血管中,其中lmL为抗凝血,
4rrd为非抗凝血。
1.3测定指标
异系数(RDW-CV);(II)小细胞比值;(12)小细胞计数。
1.4测定方法
biochemical
血液生化指标测定:采用日本日立公司生产的全自动生化仪(automatic
7060),常规操作测定各类生化指标。血液生理指标测定:采用美国雅培公司生产的全自动血球计数仪
(automatic 3700),测定各类血细胞数及血红蛋白含量。
hematologicanalyzer,Cell.Dyn
1.5统计
11.0软件进行统计分析,计算均数和标准差(i士s),以a=0.05为显著性差异标准。
利用SPSS
2结果
2.1克隆猪生化指标
体细胞克隆巴马小型猪的血液生化值见表1,结果显示:体细胞克隆猪生化指标和同期普通巴马小型猪
差异不显著(P0.05)。
表1雄性克隆猪与普通猪常见血液生化指标
304 201
1东莞第二届国际小型猪学术论坛暨大型实验动物生物医药研究应用研讨会
2.2克隆猪生理指标
体细胞克隆巴马小型猪的血液生化值见表2,结果显示:体细胞克隆猪生理指标和同期普通巴马小型猪
差异不显著CPO.05)。
表2雄性克隆猪与普通猪常见血液生理指标
3讨论
测定结果显示,体细胞克隆雄性巴马小型猪生理生化指标和同期普通巴马小型猪无显著差异。马青艳
等【9】对广西小型克隆猪的繁殖性能的研究发现,利用克隆猪进行繁育后代,其后代各项生产性能没有受到
影响。另外,Shibata等【lo】在克隆金华猪的研究中发现,克隆金华猪后代的肉质性能与普通猪相似。这些与
作者研究克隆小型猪的结果上都有相似之处。
小型猪具有体形较小、遗传稳定、易于操作和饲养成本低等优点,正逐步成为生物医学研究中非常重
要的实验动物。实验动物的血液生理、生化正常参考值是生物医学研究的重要基础指标,也是生物医学研究
中的重要依据。血液理化值不仅对了解动物的生理状态有指导意义,而且也是病理学、生理学、毒理学研究
以及探讨人类疾病的发病机理等研究中的重要参考指标[n】。有研究表明,小型猪部分血液、生理、生化指
标都与人类相近【5川】。
在人类异种组织器官移植方面,小型猪不失为理想的供体之一。用于器官移植,首先应育成成体体重
50蝇左右的中型品系猪,其次需通过转基因技术将人类的某些基因转入小型猪体内,从而使小型猪的生
物学特性更与人体吻合。利用克隆技术能够加快优良品种的育种进程,缩短育种年限,并在短时间内获得
大量遗传同质的优秀后代,提高育种效率【5】。因此,体细胞克隆小型猪极有希望更好地为人类异种器官移
植服务。
本实验中的体细胞克隆巴马小型猪是实验室前期研究成果,因实验材料有限,本实验只对4头雄性克
隆小型猪进行了测定,而雌性克隆小型猪的生理生化指标还有待进一步的实验测定。
参考文献(略)
体细胞克隆巴马小型猪部分生理生化指标的初步测定
作者: 陈会兰, 张德福, 吴彩凤, 戴建军, 张廷宇, 张树山, 顾晓龙, 吴斌
作者单位: 陈会兰(上海海洋大学水产与生命学院,上海 201306), 张德福,吴彩凤,戴建军,张廷宇,张
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