农药合成与分析5..pptVIP

高效液相色谱法测定蔬菜中3种有机磷农药残留量 高效液相色谱 1?实验部分  1．1?仪器与试剂  仪器．LC-1OAT高效液相色谱仪(日本岛津公司)， 包括：SPD-10AVP／10APVP紫外-可见检测器，LC-1OA高压溶液输送泵和N2000色谱工作站(浙江大学智能信息工程研究所)； BF2000氮气吹干仪(北京八方世纪科技有限公司)； FS-1电动匀浆机(金坛市富华仪器有限公司)． 试剂．甲基对硫磷标准品(99.0％，国家农药质检中心(沈阳))；乙基对硫磷标准品(99.0％，天津农药质检中心)； 甲拌磷标准品(98.0％，天津农药质检中心)；甲醇(色谱纯，北京化工厂)；乙腈(色谱纯，天津市博迪化工有限公司 实验用水为重蒸馏水。  1．2?色谱条件 色谱柱为Shim-PackVP-ODS(150L×4．6)；流动相为V甲醇：V水=85：15； 流速为1.0mL／min．进样量20μL，以峰面积外标法定量。  1．3?标准溶液的配制  准确称取一定量的农药标准品，用甲醇制成一定浓度的储备液，再逐级稀释储备液，得质量浓度分别为0.10、0.50、1.0、1.5、2.0mg／L的标准混合液。  1．4?样品处理方法  取1000g的白菜，取可食部分，用干净的纱布擦去样品表面的附着物，采用对角线分割法，取对角部分，将其切碎． 准确称取3份25g试样，分别加入50.0mL的乙腈，在匀浆机中匀浆2min后用滤纸过滤，滤液收集到装有5g氯化钠的100mL的具塞量筒中，盖上塞子，剧烈震荡1min，静至10min，使乙腈与水相分层．将含乙腈的有机层经盛有3g的无水硫酸钠的漏斗过滤于100mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，从中吸取10mL溶液，再用氮气吹干仪吹至近干后用甲醇溶解定容至5mL，经0.45μm滤膜过滤后进样。  2?结果与讨论  2．1?测定波长的选择  分别将3种农药的标准储备液依次用UV一1100紫外／可见分光光度计进行波长扫描，测得3种农药的最大吸收波长分别为甲基对硫磷265nm，乙基对硫磷259nm，甲拌磷为238nm．综合考虑3种组分的最大吸收值及灵敏度，最终选择紫外检测波长为250nm。  2．2?流动相组成对分离度的影响  实验考察了甲醇-水的不同比例对甲基对硫磷、乙基对硫磷、甲拌磷分离的影响。实验结果表明，随着甲醇含量的增加，其分离度逐渐减小，当甲醇：水=85：15时，各组分仍能够得到很好的分离，且分析所用的时间较短。  2．3?工作曲线和检出限  取“1．3”节的标准溶液，在优化的色谱条件下进行分析，得到标准色谱图。同一样品平行测定5次，取其平均值，绘制工作曲线，以峰面积A对浓度c(mg／L)回归计算，结果表明线性关系良好，回归方程、相关系数和检测限。  2．4?精密度实验  取质量浓度为1.5mg／L的混合标准品，在上述色谱条件下，连续进行7次测定，经计算得到测定甲基对硫磷、乙基对硫磷、甲拌磷的精密度RSD分别为4.6％、3.2％、2.9％。  2．5?回收率测定  在已知含量的白菜样品中分别加入不同浓度的有机磷农药标准品，按“1．4”节方法制备样品液进行测定，扣除样品中原有的农药含量，求出加标回收率，结果可知，甲基对硫磷回收率为95.44％～98.33％；乙基对硫磷回收率为93.33％～101.67％；甲拌磷回收率为94.00％～97.78％ 2．6?样品分析  在白菜中加入上述3种农药作为模拟蔬菜样品，按“1．4”节方法处理样品后按上述色谱条件进行测定。得到样品色谱图如图所示。甲基对硫磷、乙基对硫磷、甲拌磷的残留量分别为1.75、2.13、1.83mg/kg。  * * *