lectSuReLX的动态结合载量研究Application28987525AA.pdfVIP

GE Healthcare Life Sciences 应用文献 28-9875-25 AA 亲和层析 用 于 捕 获 高 表 达 量 单 克 隆 抗 体 的 MabSelect SuRe™ LX 的动态结合载量研 究 在不同的停留时间和物料浓度下测定 用于 此外，基于 protein A 的层析介质很容易在 捕获单克隆抗体的碱稳定性的、 Protein A 小规模和大规模使用。 来源 的亲和层析介质 （树脂）MabSelect SuRe LX 的动态结合载量 （DBC）。DBC 随着 因此，protein A 层析介质形成用于单克隆 停留时间的增加而增加，而样品中单克隆抗 抗体纯化的平台方法基础。随后可以使用各 体的浓度没有仸何显著的影 响。也比较了 种层析技术及其组合技术进行下游加工，特 MabSelect SuRe LX 和 MabSelect SuRe 对 别是离子交换、多模式和疏水作用层析。 于 七 种 不 同 的 含 有 单 克 隆 抗 体 物 料 的 DBC。在较长的停留时间，MabSelect SuRe MabSelect™亲和层析介质的关键作用 LX 显示出 20%到 46%的更高的 DBC。幵分 基于 protein A 配体的 MabSelect™家族的亲 析了两者的生产力。结果表明，在整个寿命 和层析层析介质 （MabSelect, MabSelect Xtra 周期，MabSelect SuRe LX 能够比 MabSelect ™和 MabSelect SuRe）已经被生物制药单克 SuRe 纯化多达 50%以上的抗体。 隆抗体的大规模商业化厂商所广泛接受。 MabSelect™家 族 的 最 近 的 一 个 新 成 员 是 MabSelect SuRe LX，它是含有与 MabSelect 介绍 SuRe 具有相同硬度的高流速琼脂糖基质和 由于在单克隆抗体生产上更大的经济压力， 碱稳定性配体。MabSelect SuRe LX 因此享 在哺乳动物细胞培养液中抗体的 表达量在 有相同的性能属性，例如碱和蛋白酶稳定性 过去的 20 年中已经被大大提高。今天我们 以及常规的洗脱。然而，与 MabSelect SuRe 通常可以看到 1 到 8g/l 的表达量 ，而且已经 相比，MabSelect SuRe LX 在稍长的停留时 有高至 15 g/l 或更高的物料表达水平的报 间提供增加 20%以上的 DBC。例如在 6 分钟 道。对于生产中高效的层析纯化的需求也已 停留时间，层析介质对人 IgG 的结合载量大 经相应地提高。除非这种需求得到满足，纯 约为 60 g/l。 化操作风险限制它们能够提供的通量，这将 导致成本高昂的下游工艺的瓶颈问题。 本研究通过测定不同停留时间和物料浓度 时层析介质的 DBC 研究了单克隆抗体捕获 单克隆抗体纯化策略 期间 MabSelect SuRe LX 的性能。来自 单克隆抗体的大规模纯化通常由两个或三 MabSelect SuRe LX 的数据也与 MabSelect 个层析步骤组成，而 protein A 是第一个捕 SuRe 进行了比较。此外，对于两种层析介 获步骤所选择的亲和