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RNAi抑制大肠癌HCT116细胞株VEGF2mRNA表达的实验研究.pdf
第 27 卷第 11 期 第 三 军 医 大 学 学 报 Vol. 27 , No. 11
2005 年 6 月 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE Jun. 2005 1089
( )
文章编号 2005 论著
RNAi 抑制大肠癌 HCT116 细胞株 VEGFmRNA 表达的实验研究
1 2 1 1 1 2
(第三军医大学 : 西南医院普通外科 ,重庆 400038 , 新桥医院心血管外科 ,重庆 400037)
吕 伟 ,郝 嘉 ,郝迎学 ,张 超
( ) (
提 要 : 目的 研究载体介导的 RNAi RNA interference 技术对大肠癌细胞株 HCT116 中血管内皮生长因子 vascular
)
endothelial growth factor , VEGF mRNA 表达的抑制作用。方法 依据 Tuschl 等设计 siRNA 的原则 , 以VEGF 为靶基因设计并
(
合成有小发夹结构的两条 DNA 序列 ,经退火成互补双链 ,再克隆到载体 Pavu6 + 27 中构建重组体 Pavu6 + 27VEGF siR
) ( )
NA 。DOTAP 脂质体法转染重组体至大肠癌 HCT116 细胞株 ,经 G418 筛选 , 以空质粒 Pavu6 + 27 转染为对照 ;半定量 RT
( )
PCR 法观察 HCT116 细胞中 VEGFmRNA 表达改变。结果 ①成功构建发卡样 VEGF siRNA small interfere RNA 真核表达载
( )
体 Pavu6 + 27VEGF siRNA ; ②Pavu6 + 27VEGF siRNA 转染 HCT116 细胞后 ,VEGFmRNA 表达较空载体 Pavu6 + 27 转染的
对照组显著下降。结论 成功构建载体介导的 VEGF 靶向 RNA 干扰
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