TUNEL法原位检测心肌细胞凋亡的改进_董小莉.pdfVIP

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TUNEL法原位检测心肌细胞凋亡的改进_董小莉.pdf

·1038 · 中国病理生理杂志 Chinese Journal of Pathophysiology 2010 ,26 (5):1038 - 1040 [ ] 1000 - 47 18 (2010)05 - 1038 - 03 文章编号 * TUNEL 法原位检测心肌细胞凋亡的改进 1 1△ 1 1 2 , , , , 董小莉 谭 宁 符永恒 邓宇珺 孙凯亮 1 2 ( , , , 510080 ; , 510515) 广东省心血管病研究所 广东省人民医院 广东省医学科学院 广东广州 南方医科大学 广东广州 [ ] : (TUNEL) , 摘 要 目的 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 是检测细胞凋亡的常用方法 TUNEL 。 TUNEL 但以往仍有 假阳性率高的报道 本实验目的在于探讨应用 检测心肌细胞凋亡时增强其特异性的 。 : (2 m) (3 m) TUNEL 。 HE 方法 方法 缺血再灌注心肌组织的石蜡切片 μ 和冰冻切片 μ 进行 染色 分为石蜡切片 染 , TUNEL , TUNEL 。 TUNEL , 色组 石蜡切片常规 组 冰冻切片改良 组 石蜡切片常规 组完全按照试剂盒说明书进行 光 ; TUNEL (FITC) dUTP 4 ’,6 - - 2 - (DA- 学显微镜下观察 冰冻切片改良 组使用荧光素 标记的 及 二脒基 苯基吲哚 PI) , 。 :TUNEL , 双重荧光染色 在共聚焦显微镜下观察 结果 改良法凋亡背景清晰 阳性细胞主要分布在缺血再灌注 , HE (P 0. 05); TUNEL , 损伤区域 其凋亡检出率与石蜡切片 染色相比无显著差异 常规 组凋亡背景清晰度较差 非 , HE (P 0. 01)。 : 缺血再灌注损伤区域亦有大量阳性细胞出现 其凋亡率明显高于石蜡切片 染色 结论 冰冻切片改 TUNEL SD 。 良 法可能是更适宜研究 大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡

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