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TUNEL法原位检测心肌细胞凋亡的改进_董小莉.pdf
·1038 · 中国病理生理杂志 Chinese Journal of Pathophysiology 2010 ,26 (5):1038 - 1040
[ ] 1000 - 47 18 (2010)05 - 1038 - 03
文章编号
*
TUNEL 法原位检测心肌细胞凋亡的改进
1 1△ 1 1 2
, , , ,
董小莉 谭 宁 符永恒 邓宇珺 孙凯亮
1 2
( , , , 510080 ; , 510515)
广东省心血管病研究所 广东省人民医院 广东省医学科学院 广东广州 南方医科大学 广东广州
[ ] : (TUNEL) ,
摘 要 目的 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 是检测细胞凋亡的常用方法
TUNEL 。 TUNEL
但以往仍有 假阳性率高的报道 本实验目的在于探讨应用 检测心肌细胞凋亡时增强其特异性的
。 : (2 m) (3 m) TUNEL 。 HE
方法 方法 缺血再灌注心肌组织的石蜡切片 μ 和冰冻切片 μ 进行 染色 分为石蜡切片 染
, TUNEL , TUNEL 。 TUNEL ,
色组 石蜡切片常规 组 冰冻切片改良 组 石蜡切片常规 组完全按照试剂盒说明书进行 光
; TUNEL (FITC) dUTP 4 ’,6 - - 2 - (DA-
学显微镜下观察 冰冻切片改良 组使用荧光素 标记的 及 二脒基 苯基吲哚
PI) , 。 :TUNEL ,
双重荧光染色 在共聚焦显微镜下观察 结果 改良法凋亡背景清晰 阳性细胞主要分布在缺血再灌注
, HE (P 0. 05); TUNEL ,
损伤区域 其凋亡检出率与石蜡切片 染色相比无显著差异 常规 组凋亡背景清晰度较差 非
, HE (P 0. 01)。 :
缺血再灌注损伤区域亦有大量阳性细胞出现 其凋亡率明显高于石蜡切片 染色 结论 冰冻切片改
TUNEL SD 。
良 法可能是更适宜研究 大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡
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