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不同组织裂解液对细胞因子ELISA检测的影响.pdf

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不同组织裂解液对细胞因子ELISA检测的影响.pdf

· 344 · 四川医学 2012年2月第 33卷 (第2期) SichuanMedicalJanuary 2012,Vo1.33。No.2 , 论著 不同组织裂解液对细胞因子 ELISA检测的影响 徐 峰 (眉山市人民医院检验科,四川 眉山620010) 【摘要】 目的 研究不同组织裂解液对ELISA检测细胞因子浓度的影响。方法 IuPA、PBS及ELISA试剂盒 自带的 稀释液分别用于稀释 IFNy,tL一10,IL-6,TNF 细胞因子的标准品,并对标准品进行检测。结果 RIPA稀释液显著抑制IFN7 标准品检测结果。结论 ELISA检测细胞因子时需要根据检测的细胞因子的不同,选择相应的裂解液对样本进行处理。 【关键词】 ELISA;细胞因子;组织裂解液 【中图分类号】 R392.11 【文献标识码】 A 【文章编号】 1004-0501(2012)02-0344-03 TheinfluenceoftissuelysisbufferforeytokineleveldetectedbyELISA.XUFeng.ThePeoplesHospitalofMeishan, Meishan,Sichuan620010,China 【Abstract】 Objective Inthestudy,weexaminedtheinfluenceoftissuelysisbufferforeytokinelevelwhichWaSdetected byELISA(enzyme—linkedimmunosorbentassay).Methods ILIPA,PBSandtilediUutionbufferincludinginELISAKitwere usedtodilutethestandardofIFN,IL一10,IL-6,andTNF.FourcytokineslevelofstandardsweredetectedbyEHSA.Result ComparedwithPBSanddillutionbuffer,theresultsofELISA showedthatIFN levelwasinhibitedbyRIPA.Conclusion Differ- entlysisbuffershouldbeselectedtotreatingsamplesaccordingcytokinetypewhichwouldbeexaminedbyELISA. K【eywords】 ELISA;cytokine;tissuelysisbuffer 细胞因子是小的细胞信号蛋 白分子,由神经胶质 1 材料与方法 细胞和众多的免疫细胞分泌。在实验研究中,血浆或 者血清中细胞因子的浓度检测可以直接用血浆或者血 1.1 材料:RIPA裂解液购于碧云天公司,主要成分为 清进行检测 ,而局部组织中细胞 因子的浓度则通常需 50mMIris(pH7.4),150raMNaCI,1% NP-40,0.5% SO— 要使用组织或者细胞裂解液对组织或者细胞胞膜、胞 dium deoxycholate,0.1% SDS.以及 sodium orthovanada— 浆、胞核上的蛋 白质进行裂解。可 以选择的组织或者 te,sodiumfluoride,EDTA,

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