热休克蛋白70基因转染抗心肌细胞凋亡对缺氧复氧损伤的保护作用.pdfVIP

·3436· 。基础研究。 热休克蛋白70基因转染抗心肌细胞凋亡对缺氧／ 复氧损伤的保护作用 潮季春万力 何明 程晓谤 【摘要】 目的观察比较热休克蛋自70对心肌细胞急性实验性缺氧／复氧损伤的保护作用及 其与热体克心肌细胞保护模裂之间作用的爨同。方法送行大鼠乳鼠原代心腿缨胞壤养，分为4维： 空白组(对照)，缺氧／再灌组(A／R)，热休克蛋白组(A／R+Hs)和pcDNA热休克蛋白质粒组 (pcDNAHs％)。用脂质体对pcDNAHSp7。质粒包裹，莠转导入提关心腿缨胞内。射一PCR检溅 HsP70mRNA表达、Westem印迹检测Hs‰强白质表达。检测心肌细胞存活率(四甲基偶氮唑蓝比色 法)、培养液中乳酸脱氢酶活性、心曩恁细胞越微结构改变(透射毫。镜)及撼亡指数鼹察心筵惩细胞按饬程 度。结槊A／R+HS组和A／R+pCDNAHsP70组细胞存活率显著提高(71．8±10．3)％、(73．4士 12。2)％；(￡D瓣)活悭臻显降低(14+3±2。6)lⅣ毛、(14。6士2．9)l影己；缨霪鏊超微结梅骥显改“蔫；∥较 组的HSP70mRNA和鬣白质含量比A／R+Hs组和A／R+pcDNAHsP70组，明显偏低(1．87±0．23、 2。∞±O．34倍尹O．01)。二者熬缨赡凝亡指数魂较A／鼗组骥显降低。缝论珏s‰基嚣巍表达翡 对抗缺氧／复氧对心肌细胞的损伤，其作用与抗细胞凋亡有关。 【关键词】蒸傣巍蛋鑫类；·§鼹霉滚注损伤 i埘ury l鼢t 70gene h_{o耄eI：辆n醴擞y嘲蹦ocy砉鲻agai粼耄a珏。蠛a-瑚搿g髓er魏眭onby sho文pro耄ein rats tra璐￡ec舶n：燃pe曲嫩nt、jI嚏m uU^一c九un。，飘Ⅳ“，凇施憎，C好g，vG崩∞一s^墩 +玩p。砖粼难矿如磁D撇疵rS貉秽秽，苑稻|建萨鑫8≠8蠢渤肇i掘￡鲈髋黼玩醒浇妇璐毋，溉黼玩鼹gs3∞舔， Gh协口 踟獬D蒯i粥球磁盎or：C托gA移盖妄∞一馥鼯，西凇疆：菇i梯郴|}毫H珑e枷器@j勰．c8m To the in role“heatshock the 【Abst聃ct】objectivestudypmtective protein(HSP)70expression cells we耱 nlyoc缸d主alundergoing蹴oxia／聪oxygen默醍on。Me馕耐sMyoc射出oqtes碟neon敷砖SD￥ats culturedand dividedinto4 anoxia／ random王y groups：anoxia／reped．usion(A／R)groupundergoing transfectionofHSand repe血sion；A／R+HSgroup，unde增oing A／R，pCDNAHS％+A／Rgroup， A／嚣， andeo曲．ol 髓一托Rand 疆瘸elg。i甥trans蠡∞鞋。珏0f嚣posome—coated联Sp7。pCDNandgroup． Westem wereusedtodetectthemRNAand of inthecells．Thecell blotting proteinexpres8ionHsP70 levels《18e硅c vi痨i珏姆w勰ex瓣inedby鞋暇me斑od，The de姆d摊g￡珏髂el圆嚣)，跳纛s蛆黼c豫ati魏e