编码人类vasohibin-1基因的重组腺病毒抑制碱烧伤诱导的小鼠角膜新生血管.pdf

＼1746454 摘要 摘 要 目的：观察小鼠结膜下注射编码人类vasohibin-1蛋白的重组腺病毒后，该蛋 白对碱烧伤诱导的角膜新生血管(corneal lff9 方法： 110只balb／c小鼠随机分成两组。治疗组小鼠结膜下注射5ul pfu 鼠结膜下注射5ul 0．1NNaOH 任何处理。结膜下注射5天后，所有小鼠右眼角膜中央采用2．5ul 烧灼30秒，诱导角膜新生血管模型。碱烧伤后观察9天，每3天观察角膜新生 血管生长情况，并照相，计算新生血管占全角膜的比值。分别在以上3个时间 观察点每组取3只小鼠行免疫荧光检测，并分别在碱烧伤前、碱烧伤后3天和 blott 9天分别每组取10只小鼠行westerning检测，观察人类vasohibin—l 蛋白在角膜组织中的表达情况。观察期末，运用实时定量逆转录酶链式反应法 vasohibin一1的基因表达异同。 结果：碱烧伤后3、6和9天，治疗组角膜新生血管面积比分别为7．11％±3．91％、 的治疗组角膜新生血管在碱烧伤后的每个观察点明显减少(均P=0．ooo)。碱烧 伤后3天，vasohibin．1蛋白明显表达于上皮下基质内，高度集中在新生血管区 域。有的vasohibin一1蛋白散在分布于角膜中央的基质浅层和深层，而非集中在 新生血管区。相比，结膜下注射AdNull组的小鼠角膜及正常角膜不表达人类 vasohibin．1蛋白。结膜下注射Ad．Vasohibin．15天后，碱烧伤f11U‘，western 一直持续高表达至碱烧伤后9天。而空载体组及正常对照组不表达。治疗组 P，=O．047；t2=．2．236，P2=0．041o两组相比，VEGF和VEGFRl的基因表达水 平没有显著差异(均P0．05)。 结论：结膜下注射编码人类vasohibin．1基因的重组腺病毒显著减少碱烧伤诱导 的角膜新生血管。其功能受下调VEGFR2的表达调控。 摘要 关键词：角膜新生血管；人类vasohibin．1；重组腺病毒 llI Abstract ABSTRACT the and effectofrecombinant Purpose：Toinvestigatefeasibility adenovirus humanvasohibin-1for comealneovasularizationinalkali encoding inhibiting burned micecorneas unctivalection． bysubconj inj miceeachreceived of 109 Methods：Fifty subconjunctivalinjection 5¨l pfu defectiveadenoviralvector human replication