实验一植物根尖细胞有丝分裂的制片与观察.pdfVIP

实验一 植物根尖细胞有丝分裂的制片与观察 一、实验目的 掌握根尖有丝分裂制片技术，熟练有丝分裂全过程并 观察染色体形态特征。 二、原理 有丝分裂是生物体细胞增殖的主要方式。在有丝分裂过程 中，细胞核内染色体准确复制、均等分裂，使母、子细胞 在遗传物质组成上达到等质同量。既维持个体正常生长发 育，又保证物种的连续性和稳定性。 高等植物的有丝分裂主要发生在根尖、茎尖及幼叶等部位 的分生组织，将这些分生组织固定、水解、染色和压片， 再置于显微镜下即可观察到大量处于有丝分裂各时期的细 胞和染色体。 二、原理 有丝分裂期主要分为四个连续的过程： 前期：染色体缩短变粗，核仁逐渐消失，核膜开始崩解 中期: 染色体分散排列赤道板上，纺锤体形成 后期: 着丝粒分裂为二，姐妹染色单体分离移向两极 末期: 核的重建，细胞分裂为二，子细胞形成。 三、材料 大蒜根尖（2n=16 ）：数目少，个体比较大，易观察。 四、方法步骤 取材：根尖长到2-3 cm长时，10时左右取材。  固定：卡诺固定液（无水乙醇 ：冰醋酸= 3 ：1 ） →固定4 小时～7天→95% 乙醇冲洗2次→70% 乙醇 中长期保存 水洗：蒸馏水洗20分钟（换三次蒸馏水），洗去固定液。 水解：在1 mol/L HCl中，（60 ±1 ）℃水解6 min。水解后用蒸馏水洗 去HCl 。 酶解：加入酶（2.5%果胶酶 ：2.5%纤维素酶= 1 ：1 ），恒温箱 （20 ～25 ℃）中酶解15分钟。 染色：滴加卡宝品红染色5 min ～10 min。 五、观察结果—— 大蒜根尖有丝分裂 五、观察结果—— 大蒜根尖有丝分裂 五、结果观察 观察有丝分裂间、前、中、后、末各时期，及早中期染色 体形态结构，并绘图。