外周血造血干细胞体外保存的研究进展.pdfVIP

塞盟医堂盘查!Q塑生箜!!鲞笙!!塑 外周血造血干细胞体外保存的研究进展 娄琳陆志刚 外周血造血干细胞移植(PBsCT)是异，表明与10％DMs0相比．用5％DMSO 目前治疗恶性血液病和多种实体瘤的有 作为冻存保护剂是安全有效的。以上研 剂，测定临床造血恢复的时间，发现两组 效方法。外周血造血十细胞的体外保存 究提示用5％DMs0冻存PBsc是可行有没有明显差别。证明联合保护剂的可行 是PBscT的重要组成部分。如何经济、高效的。 性。HES可以在细胞膜外形成保护膜，阻 效地体外保存外周血造血干细胞，一直 除了单纯降低DMs0的浓度外，国止细胞内水分子外流．稳定细胞膜，保护 受到国内外的关注。现就有关外周血造 内外学者们还积极地寻找可以替代 细胞．减少细胞损伤．复苏时．HEs还可以 血干细胞的体外保存技术的研究进展作 DMS0的无毒的安全的冻存保护剂。防止DMs0所致的细胞肿胀。靳海杰等…] 一综述。 Buchanan等+8j用0【一溶血素在细胞膜上打 1冻存保护剂 孔．成功的使海藻糖进入细胞内，分为四 液作为保护剂．将PBSC置于一80℃冻存． 二甲基亚砜(DMSO)是目前国内外组进行比较，A组：10％DMS0；B组：细胞 冻存后3、6个月及1年进行复苏。分别 应用最为广泛的PBsc冻存保护剂。普遍外的海藻糖浓度为0．2mol：C组：细胞内取样进行有核细胞计数、锥虫蓝拒染率 应用的DMs0浓度为10％．但DMS0本的海藻糖浓度为0．2mol：D组：细胞内外 身有一定的毒性．据文献卜，]报道．回输 的海藻糖浓度均为O．2m01．结果发现复 检测．结果发现冻存3和6个月没有差 DMS0保存的造血干细胞后患者出现恶苏后D组在细胞活力和集落形成能力方 别．冻存1年后有显著下降．表明这种联 心、呕吐、发热、呼吸困难、一过性高血 面与A组差异不明显，证明海藻糖可以 压．过敏反应及神经毒性症状等不适。因 作为PBsc的冻存剂，从安全性角度考等㈦用10％DMs0联合细胞膜稳定剂 此如何减少输入体内的DMs0的量和寻虑．海藻糖是一种对人体无害的二糖，可 找可以取代DMs0的新的冻存保护剂成以取代DMSO。但是用a一溶血素存细胞 为近年来国内外研究的热点。 膜上打孑L，在一定程度上破坏了细胞膜． 1．1 单一冻存保护剂 为减少输入体内 无法控制进入细胞的海藻糖量．容易导 中加入细胞膜稳定剂(海藻糖或牛磺酸) DMS0的量．很多学者尝试用低浓度的致海藻糖过虽进入细胞．引起细胞过度 和生物抗氧化剂(抗坏血酸、维牛素E和 DMs0冻存PBsC，取得了较好的成果。膨胀。闪此这种方法只能用于实验室研 过氧化氢酶)．结果表明联合10％DMSO+ Abrahamsen等i4]对使用5％和】O％的DMS0究，还不能用于临床。Scheink6nig等【9]分海藻糖+过氧化氢酶作为冻存保护剂的 冻存PBsc效果进行比较，发现复苏后别用1、O．5和0．25mol／L的海藻糖冻存效果更佳。联合保护剂从多个方面保护 PBsc．对照组用lO％DMs0．结果表明 5％组cD34+细胞的回收率和存活率均高 PBsC．已成为国内外广泛采用的体外保 0．5 于10％组．5％组CD34+细胞凋f率和坏mol海藻糖组的各项检测指标结果与存PBSC的方法。 死率分别为5％和9％，10％组为7．5％和对照组相近。复苏后细胞活力lO％ 2降温速度及保存温度 DMSO组为33％．0．5mol海藻糖组为 21％．这些数据表明5％DMs0可以更好 目前PBsc的保存有冷冻保存和非 的保护PBSC。2004年Abrahamsen等。5】又32％：lO％DMs0组形成集落的总数为冷冻保存(4℃保存)两种。冷冻保存又分