苦参碱联合DMSO大规模冻存人胎肝细胞的实验研究.pdfVIP

·5 12 · 广东医学 　2009 年 4 月 第 30 卷第 4 期 　 Guangdong M ed ica l Journa l　Ap r. 2009 , Vol. 30 , No. 4 ciency [ J ]. J Bone M iner R es, 2004 , 19 ( 11) : 1 82 1 - 1 826. [ 6 ] 　K IMBLE R B , MA TAYO SH IA B , VANN ICE J L , et al. Simu la [ 5 ] 　HAM K D , CARL SON C S. Effects of estrogen rep lacem ent thera neou s b lock of interluek in - 1 and tum er necrosis factor is requ ired p y on bone turnover in subchondral bone and ep iphyseal m etap hy to comp letely p revent bone lo ss in the early postovariectomy p eriod seal cancellou s bone of ovariectom ized cynomolgu s monkeys[ J ]. J [ J ]. Endocrinology, 1995, 136 ( 7) : 3 054 - 3 061. Bone M iner R es, 2004 , 19 ( 5) : 823 - 829. (收稿日期 : 2008 - 10 - 27　编辑 :庄晓文 ) 苦参碱联合 DM SO 大规模冻存人胎肝细胞的 实验研究 △ △ 龚独辉 , 潘明新 , 姚坤厚 , 夏武政 , 康玉占, 汪艳 , 高毅 ( ) 南方医科大学珠江医院肝胆外科 广州 510282 　　【摘要 】　目的　观察苦参碱对大规模低温冻存人胎肝细胞功能的影响 。方法 　改良肝细胞获取方法分离人 ( 7 7 7 7 7 - 1 ) 胎肝细胞 ,经过 1 h预培养后 。将 5种不同浓度 1 ×10 , 25 ×10 , 5 ×10 , 75 ×10 , 10 ×10 ·mL 的胎肝细胞 以 6 m g/L 苦参碱 + 5%DM SO 为冻存保护液置于骨髓干细胞冻存袋在液氮中冷冻保存 1个月 。1个月后复苏 ,进 行活率 、形态学及功能检测 。结果 　5种不同浓度的细胞冻存 1个月后 ,细胞浓度为 25 ×107 ·mL - 1组复苏后存 ( ) 活率与其余四组相比差异有显著性 P 005 ,且明显高于其余四组 。复苏后细胞存活率和 24 h 贴壁率分别为 ( ) 73% , 69% ,经过短期培养后 ,细胞功能逐渐恢复 。结论 　 1 苦参碱对低温冻存的人胎肝细胞有保护作用 ,与二 甲基亚砜联用可降低 DM SO 的浓度 ; ( 2) 以 5% DM SO + 6 m g/L 苦参碱作为冻存保护剂 ,细胞浓度在 25 ×107 · - 1 mL 冻存效果最佳 。该大规模冻存方法基本上可以满足生物人工肝肝细胞应用的需求 。 【关键词 】　生物人工肝 ; 人胎肝细胞 ; 冷冻保存 ; 苦参碱 ( ( )