猪肉发荧光现象初步研究.pdfVIP

ChineseJournalofVeterinaryMedicine 中国兽医杂志 2011年 (第 47卷 )第 2期 61 猪 肉发荧光现象初步研究 肖安东，邓云波 ，李 裕 ，周汝顺 ，匡光伟 ，隆雪明，徐丽枚 ，宋跃君，陈启友 ，吴礼龙 (湖南省兽药饲料监察所 ，湖南 长沙 410006) 中图分类号 ：$858．28 文献标识码 ：B 文章编号 ：0529—6005(2011)02—006102 2010年 2月间，有市民发现长沙市某大型超市 厌氧生长试验 、溶血试验、各种糖发酵试验 、精氨酸 所售鲜猪肉夜间有荧光现象 ，随后 2O多天内又相继 双水解酶试验、赖氨酸脱羧 酶试验 、硫化氢 试验 、尿 有多名消费者反映该家超市所 购猪 肉在夜 间发荧 素酶试验等生化试验 。 光 。随后在对长沙市 内各生猪屠场、超市、猪 肉批发 2．4 荧光猪 肉复制试验 市场、农贸市场等动物产 品生产 、经 营、贮藏环节进 24．1 猪 肉样品的制备与分组 取市售鲜猪 肉约 行大面积排查中，共检样品 295个 ，发现猪 肉发荧光 4kg，均 分为 4份 ，随机分 为 2组 (试验 组和 对照 现象 13例 ，均来 自上述 同一超市 。经感观检查 、细 组)，每组 2份 。 菌分离纯培养与鉴定 ，以及复制试验等，查明引起本 24．2 菌液制配 取分离纯化的单个菌落 ，用灭菌 次猪 肉发 荧光现 象 系生 猪 屠 宰后 荧光 细 菌 污染 生理盐水作适当稀释后备用 。 所致 。 2．4．3 染菌与培养 试验组 ：以制备好 的菌液涂抹 1 材料 鲜肉表面；对照组 ：以灭菌生理盐水涂抹表面 ，两组 1．1 试验病料 具有荧光现象的鲜猪 肉。 均置室温 (18℃)条件下培养。 1．2 培养基及试剂 分离培养基为琼脂培养基 (含 3 结果 胰蛋 白、3 NaC1)和灭菌血 营养琼脂 培养基；生化 3．1 感观检查 猪 肉样品表面暗红色、无异昧、色 鉴定培养基及试剂为尿素酶高层斜面、明胶培养基、 泽、气味等感观指标未见异常。在暗室中观察 ，发现 蔗糖 、乳糖 、葡萄糖发酵管、葡萄糖蛋 白胨水 、甲基红 猪 肉肌 肉组织表面发出淡蓝绿色光 (图 1)，皮肤、脂 试剂 、硫化氢试剂和枸橼酸盐试剂等。 肪部分未见荧光现象 。用 手触摸发荧光肌 肉表面， 1．3 生物显微镜 ；恒温培养箱。 可使手指粘上荧光颗粒物质 ，切开后深层肌 肉切面 2 方法 未见荧光 。将该猪 肉样品再在室温放置 48h后，荧 2．1 荧光猪 肉感观检查 对猪 肉样品表面色泽 、气 光现象会逐渐减弱直至消失。 味等感观指标进行检查 。并置暗室中观察。 2．2 细菌分离与纯培养试验 2．2．1 细菌的分离 采用荧光猪 肉表面拭 子接种 到琼脂培养基 (含胰蛋 白、3 NaC1)和灭菌血营养 琼脂培养基 ，并于 20~C培养 48h，用革兰染色法涂 片镜检 ，观察 。同时分别挑取单个 菌落接种于培养 基后观察 。 2．2．2 细菌的纯化 将挑选出来的细菌 ，按是否 有发荧光现象 、革兰染色特点及细菌的形态等特征， 采用分 区划线法冉次分类接种于普通鲜血琼脂培养 基上进行培养纯化，经镜检无杂菌后 ，荧光细菌保存 图 I 暗室 中猪 肉表面发蓝绿 色荧光 于斜面保 菌培养基中，20℃培养 8～24h，4℃冰箱 3．2 细菌的纯化 在普通琼脂上培养可见圆形 、稍 内保存一 。以备后续鉴定。 隆起 、表面光滑 、边缘 整齐、无色或接近灰 白色 的菌 2．3 荧光细菌的形态观察与生