生物样品中唾液酸和神经节苷脂的测定.pdfVIP

一 30一 ZHEJIANGCHEMICALINDUSTRY Vo1．42No．01(2011) 文章编号：1006-4184(2011)010030—04 生物样品中唾液酸和神经节苷脂的测定 高静 (青岛科技大学化工学院，山东青岛266042) 摘 要：神经节苷脂属于神经鞘脂类，结构中含有一种或多种唾液酸，是神经细胞膜的重要组成 成分。神经节苷脂和唾液酸都是具有生物活性的化合物。由于g4rl具有生物相关性，因此与每种基质 相对应的分析方法也都得到了一定的发展。本文就生物样品中适用于唾液酸和神经节苷脂的主要分 析方法做一下总结概述。 关键词：生物样品 ；唾液酸：神经节苷脂 n俞 幺召 法做一下介绍。 神经节苷脂是一类含有唾液酸的酸性鞘糖脂 ， 1．1样品制备 是神经细胞膜的重要组成成分．结构中含有一种或 1．1．i唾液酸的提取方式 多种成分的唾液酸，更确切的说，神经节苷脂是由 一 般使用两种方式处理：酸水解及固定化酶处 鞘氨基醇与脂肪酸相结合，然后通过酰胺键连接到 理 。 包含一种或多种唾液酸的低聚糖链上ll1。在物理条 酸水解是应用最广泛的处理方法。用恒温箱或 件下，唾液酸分子中含有一个负电荷 ，通常以低聚 者加热器将反应保持在加热条件下 (70o(=一90℃)。 糖 。糖脂或糖蛋白的形式存在。近年来 ，随着对细胞 最常用的酸是硫酸浓度为25～100mmol的酸溶液旧。 膜表面糖类生理功能研究的日益重视，神经节苷脂 其他研究者曾经将不同的试剂用于水解，如稀释的 的研究也 日趋受到科学界的关注．特别是随着神经 盐酸、微波处理的乙酸、次硫酸钠或者三氟醋酸，这 生物化学和神经药理学的发展，对神经节苷脂的代 些都可以减少水解时间。 谢及其生物学作用研究已经成为神经科学的重要 对于不同的酸水解都要做对照实验 (25mmo| HC1．25mmol三氟醋酸TFA，25mmolH2SO4)。用盐 课题[2】。神经节苷脂在国内大多数依赖进 口，虽然国 内外已报道了多种分离纯化的方法 ，但大多都有操 酸或TFA水解是最好的选择，虽然经过 2h的水解 会损失20％左右5[1，但是操作简便。通过从微生物中 作步骤繁琐、溶剂用量大等不足之处。目前国内外 获得的神经氨酸酶对唾液酸进行水解时损失最小， 的研究主要集中于其与生物膜其他有效成分之间 但控制生物样品的反应并不容易，因为它的释放依 的相互作用，而对神经节苷脂的分离方法的最佳选 择未给予详细的报道。因此 ，本文就多种分离纯化 赖于组织结构 以及酶的来源情况 。 方法做一下比较总结，对其分离过程起到一定的帮 酶法处理效果 比水解的效果要差，因为并不能 提取所有非游离唾液酸。相反 ，酸水解能够提取所 助。 有非游离唾液酸。但是可能会对一部分造成破坏， 1唾液酸 并且能够参与后面的反应过程，各有利弊。 唾液酸的分析从它们释放时开始，将样品纯化