异源双链和单链构像多态法筛查基因突变.pdfVIP

·288 · Chin J Med Lab Sci , September 1998 , Vol 21 , No . 5 · · 论著 异源双链和单链构像多态法筛查基因突变 张清炯 　肖学珊 　黎仕强 　申煌煊 　张丰生 　曾瑞萍 　吴开力 ( ) 　　【摘要】　目的　比较异源双链 、单链构像多态 SSCP 、异源双链SSCP 法筛查突变的效率 ,寻找简 ( ) 便有效的基因突变筛查方法 。方法 　应用聚合酶链反应 PCR 扩增 23 个已知的杂合子突变 ,分别以 异源双链 、SSCP 、异源双链SSCP 法分析突变 ,对比各方法对突变的检出情况 。结果 　23 个杂合子突 ( ) ( ) 变中 ,异源双链法 、SSCP 法与异源双链SSCP 法检出突变分别为 22 个 96 % 、20 个 87 % 和 23 个 ( 100 %) 。异源双链法结果比 SSCP 法结果稳定 ,重复性好 ,两种方法之间有一定互补性 ,异源双链SS CP 法兼有两种方法的特点 。结论 　异源双链SSCP 法突变检出率高 ,经济 、简便 ,值得在基因突变筛 查中推广应用 。 【关键词】　DNA 突变分析 　　多态现象 ,单链构象 　　核酸异源双链分子 Comparison of heteroduplex , SSCP , and heteroduplexSSCP analyses in mutational screening 　Zhang Qingj iong , X iao X ueshan , L i S hiqiang , et al Zhongshan Op hthalmic Center , S un Yatsen University of Medical Sciences , Guangzhou 510060 【Abstract 】　Objective 　To compare the effectiveness of heteroduplex , SSCP and heteroduplexSSCP analy ses in mutational screening. Methods 　DNA samples with 23 known heterozygous mutations were amplified by PCR. The PCR products were then analyzed by heteroduplex , SSCP and heteroduplexSSCP analyses separately to testify the effectiveness of each method. Results 　Of the 23 mutations , 22 were detected by heteroduplex analysis (96 %) , 20 by SSCP analysis (87 %) and 23 by heteroduplexSSCP analysis ( 100 %) . Results from heteroduplex analysis are more stable and repeatable than those o