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微波加热的时间对牛奶中细菌总数的影响.doc
微波加热的时间对牛奶中细菌总数的影响
摘 要: 【 目的】牛奶是牛乳的俗称,各种牛乳中常含一定数量的微生物。牛奶中的微生物主要来自奶牛体内以及挤奶、贮存、运输等过程中从外面的污染。生牛奶中的微生物包括细菌、真菌和酵母菌,其中以细菌的数量最多。生牛奶中的细菌总数大都在几万到几百万之间,污染严重的可超过一千万。从奶牛乳房挤出的奶并非是无菌的,在健康奶牛的乳房内也总有一些细菌存在,但仅限于极少数几种细菌,如小球菌、链球菌等,细菌的数量不多,大约在每毫升几百个左右。如奶牛发生乳房炎,则在奶中会检出大量的金黄色葡萄球菌、链球菌和化脓杆菌等致病菌。所以在健康牛的奶中,大多数微生物来自于牛的体表皮肤和外环境,以及奶离开奶牛后细菌的快速增殖。牛奶的细菌总数很大程度上决定于环境卫生、挤奶机、牛奶贮存和运输设备的清洁程度和牛奶的冷藏温度。能在越短的时间内把牛奶温度降至4℃左右,牛奶中的微生物总数就越低。本实验应用平板菌落技术测定水中细菌总数,计算出来的细菌总数仅是近似值。目前一般采用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基在保证无菌的环境下,采取不同时间用微波加热牛奶的样品,利用培养基制作平板,对牛奶用平板菌落技术测定细菌总数。牛奶的微生物学检验,在保证牛奶安全和控制传染病上有着重要意义,同时也是评价乳品状况的重要指标。
关键字:自来水 平板菌落计数技术 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基 牛奶,是最古老的天然饮料之一。营养成份很高,牛奶中的种类也非常丰富,除了我们所熟知的以外,、铁、锌、铜、锰、钼的含量都很多。最难得的是,牛奶是人体钙的最佳来源,而且钙磷比例非常适当,利于钙的吸收据美、英两国医学专家研究发现,牛奶中含有两种过去人们未知的催眠物质,其中一种是能够促进睡眠的以血清素合成的色氨酸,由于它的作用,往往只需要一杯牛奶就可以使人入睡;另外一种则是具有类似麻醉镇静作用的天然吗啡类的物质。所以,如果在早晨饮奶,就必然会使人的大脑皮层受到抑制,影响白天的工作和学习近年来,随着人们生活水平的提高,和对健康认识的加深,在各种媒体的宣传作用下,人们已开始逐渐认识到牛奶的营养价值,越来越多的家庭开始有意识的把牛奶列入日常食谱中的好坏对人们生活起着至关重要的作用而判断的标准,微生物在的数量、种类是必不可少的, 确定不同来源的生牛乳的等级、巴氏消毒牛乳的卫生标准。微生物显微镜直接计数法随机性大,对菌体数量不能做出较为宏观,全面的反应.优点是计数快速; 美蓝还原酶实验法是用于测定牛乳质量的一种定性检测法, 操作简便, 不需特别设备.它不能做为定量检查; 平板菌落计数法速度慢,需要平板上长出菌落一段时后才能计数。由于平板菌落计数法通常间做梯度稀释,所以计数的线性范围大.由于是菌悬液涂布,所以比较均匀,能较好的反应菌落的疏密程度.重复性,平行性很好,是经典的计数方法。
1 材料与方法1.1 试验时间于2011 年11月在食品学院微生物实验室内完成
1.2 材料
1.2.1实验材料实验试剂膏蛋白胨 1mol/LNaOH 1mol/LHCl 蒸馏水
1.2.3实验仪器高压蒸气灭菌锅 培养皿 天平 玻璃棒 炉匙 pH试纸(pH5.5-9.0)1.3 实验方法 1.3.1 制备培养基
1.称量 按培养基配方依次准确的称取膏蛋白胨放入烧杯中。膏常用玻璃棒挑取,放在称量纸上,称量后直接放入水中,稍微加热,便会与膏称量纸分离,然后立即取出纸片。
1.溶化 在上述烧杯中先加入少于所需要的水量,用玻璃棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解,将称好的琼脂放入已溶的药品中,再加热溶化,最后补足所损失的水分。
1.调pH在未调pH前,先用精密pH试纸测量培养基的原始pH,如果偏酸,用滴管向培养基中逐滴加入1mol/LNaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸测其pH,直至pH达7.6。反之,用1mol/L HCl进行调节。1.3.1.4 分装 待其冷却至室温后,分装于灭菌锥形瓶中,并包扎妥当。
1.3.2 生理盐水的配制
1.3.2.1 称量 准确称取氯化钠8.5g放入烧杯中,用蒸馏水溶解
1.3.2.2 定容 把烧杯中的溶液转移至1000毫升的容量瓶中,并用蒸馏水反复冲洗烧杯,冲洗烧杯的试液依旧倒入容量瓶中,至刻度线时用胶头滴管地至刻度线处,盖上玻璃塞,上下摇匀。
1.3.2.3 取出灭菌试管,向每支试管中移取9ml的生理盐水,盖上试管塞,并包扎妥当。
1.3.3 灭菌
1.首先将内锅层取出,再向外锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。
1..3.2 放回内锅层,并加入用报纸包好的培养、。
1..3.3 加盖,并将盖上的排气软管插入内层锅的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺旋,使螺旋松紧一致,勿使漏气。
1..3.4 用电炉加热,并同时打开排气阀,使水
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