第十讲光合磷酸化.pptVIP

组成中心天线的CP47和CP43是指分子量分别为47 000、43 000并与叶绿素结合的聚光色素蛋白复合体，它们围绕P680，比LHCⅡ更快地把吸收的光能传至PSⅡ反应中心，所以被称为中心天线或“近侧天线”。 《参考》（1)化学渗透学说的实验证据 ①两阶段光合磷酸化实验 指光合磷酸化可以相对分成照光阶段和暗阶段来进行，照光不向叶绿体悬浮液中加磷酸化底物，而断光时再加入底物能形成ATP的实验。 1962年，中国的沈允钢等人，用此实验探测到光合磷酸化高能态(Z*)的存在。 1963年贾格道夫(Jagendorf)等也观察到了光合磷酸化高能态的存在。起初认为Z*是一种化学物质，以此提出了光合磷酸化中间物学说。现在知道高能态即为膜内外的H+电化学势。所谓两阶段光合磷酸化，其实质是光下类囊体膜上进行电子传递产生了跨膜的H+电化学势，暗中利用H+电化学势将加入的ADP与Pi合成ATP。 ② 酸-碱磷酸化实验 贾格道夫等(1963)在暗中把叶绿体的类囊体放在pＨ4的弱酸性溶液中平衡，让类囊体膜腔的ｐＨ下降至4，然后加进pH8和含有ADP和Pi的缓冲溶液，这样瞬间的pH变化使得类囊体膜内外之间产生一个H+梯度。 这个H＋梯度能使ADP与Pi生成ATP，而这时并不照光，也没有电子传递。这种驱动ATP合成的类囊体内外的pH差在活体中正是由光合电子传递和H+转运所形成的。 这一酸-碱磷酸化实验给化学渗透假说以最重要的支持证据。 ③光下类囊体吸收质子的实验 对无pH缓冲液的叶绿体悬浮液照光，用pH计可测到悬浮液的pH升高。这是由于光合电子传递引起了悬浮液中质子向类囊体膜腔运输，使得膜内H+浓度高而膜外较低的缘故。 电子传递产生了质子梯度后，质子就有反向跨膜转移的趋向，质子反向转移时，质子梯度所贮藏的能量就被用去合成ATP。 以上实验都证实了米切尔的化学渗透学说的正确性，因而米切尔获得了1978年度的诺贝尔化学奖。 (2)H+电化学势与质子动力《了解》 e－传递与H+向膜内的运转,还会引起类囊体膜的电势变化，从而产生H+电化学势差(ΔμH+)： ΔμH+=μH+内-μH+外 =RT(ln [H+内]-ln [H+外])+F(E内-E外) =RTln([H+内]/ [H+外])+FΔE =2.3RTΔpH+FΔE 式中R——气体常数，T——绝对温度(K)，F——法拉第常数，ΔE——膜电势(V) 25℃时，ΔμH+=5.7ΔpH(kJ·mol-1)+96.5ΔE(kJ·mol-1) 将式4-31两边用F(96.5kJ·mol－1·V－1)除，规定△μH+/F为质子动力，其单位为电势(V)。在25℃时：pmf=0.059ΔpH+ΔE 叶绿体类囊体膜的质子动力大部分是来自ΔpH部分，电荷分布所产生的ΔE的贡献很小，原因是其它离子，如Cl－、K+或Mg2+也能穿透类囊体膜，当H+穿透类囊体膜时，Cl－可以与H+同向穿透，或Mg2+与H+(1Mg2+/2H+)反向穿透，这样就保持了电中性，结果不产生电势差。 3.ATP合成的部位——ATP酶《了解》 质子反向转移和合成ATP是在ATP酶(ATPase)上进行的。ATP酶又叫ATP合成酶，也称偶联因子或CF1-CFo复合体。 叶绿体的ATP酶由两个蛋白复合体组成：一个是突出于膜表面的亲水性的“CF1”；另一个是埋置于膜中的疏水性的“CFo”。 ATP酶由九种亚基组成，分子量为550 000左右，催化的反应为磷酸酐键的形成，即把ADP和Pi合成ATP。另外ATP酶还可以催化逆反应，即水解ATP，并偶联H+向类囊体膜内运输。 α亚基和β亚基交替排列组成“六角形”的“头部”， γ亚基位于“六角形”的中央空隙， δ 亚基位于“柄部” ， ε亚基与γ亚基与CF0结合。 α亚基有结合核苷酸的部位，在进行催化时可能发生构象变化； β亚基是合成和水解ATP分子的催化位置； γ亚基控制CF1转动和质子流； δ亚基也许与CF0的结合有关； ε亚基似乎能抑制CF1-CFo复合体在暗中的活性，防止ATP的水解。 δ和ε亚基还有阻塞经CFo的质子泄漏的作用。 CF1 CF1的分子量约400000，它含有α,β,γ,δ和ε5种亚基。 α:β:γ:δ:ε＝3:3:1:1:1 CFo 含有四个亚基： Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ。Ⅲ是多聚体，可能含有15个多肽。 Ⅰ:Ⅱ:Ⅲ:Ⅳ ＝ 1:1:12:1 Ⅰ和Ⅱ组成柄，Ⅲ形成质子通道，Ⅳ亚基的功能可能与建立质子转移通道或与结合CF1有关。 当类囊体膜失去CF1后，就失去磷酸化功能，如果重新加进CF1即可恢复磷酸化功能。失去了CF1的类囊体膜会泄漏质子。但是一旦将CF1加回到膜