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石油地质与工程
金 陵 科 技 学 院 学 报 CoL26,No.2
第26卷 第2期
2010年6月 JoIJIiNAI,OFⅡN】 SⅡ-兀玎1[!OFTECHNOLOGY June,2010
多重RT—PCR区分PRRSV变异株和经典
株方法的建立
张志成h,范红结 ,陈钟鸣 ,戴鼎震 ,何小明
(1.金陵科技学院动物科学与技术学院,江苏 南京 210038;2.南京农业大学动物医学院,江苏 南京 210095)
摘 要:根据GenBank发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株和变异株基因序列,设计合成了2对引物,分别扩
增NSP2和NSP9部分基 因片段 ,建立 了一种一次反转录后多重PCR鉴定区分PRRSV变异株和经典株 的方法。
该方法扩增PRRSV变异株时可获得 380bp的特异性片段,扩增PRRSV经典株时则获得380bp和 680bp两条
特异性片段,根据RT—PCR产物可将两者区分开来。试验证明该方法具有敏感性高、特异性好的特点,是一种快
速准确检测PRRSV 的方法 。
关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒;变异株;经典株;多重RT—PCR
中图分类号:$855.3 文献标识码 :A 文章编号:1672—755X(2010)02--0O85一O4
UsingM ultipleRT—PCR toDistinguish between Variant
StrainsClassicaiStrainsofPorcineReproductiveand
RespiratorySyndromeVirus(PRRSV)
ZHANGZhi—cheng ,FANHong—jie,CHEN Zhong—ming ,DAIDing-zhen ,HEXiao-ming
(1.JinlingInstituteofTechnology,Nanjing210038,China;
2.NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095,China)
Abstract:BasedonGenBank’Sstrainsgenesequenceofclassicalandvariantstrainsofporcine
reproductiveandrespiratory syndromevirus,twospecificprimersweredesignedandpartsof
gene fragmentsofNSP2andNSP9wereamplifiedrespectively.Afteronereversetranscrip—
tion,a multiple PCR method wasestablished tOdistinguish variantand classicstrainsof
PRRSV.Thismethodwas shown to gain 380bp specific fragmentsby amplifying variant
strainsofPRRSV orgaintwo380bpand680bpfragmentsbyamplifyingclassicalstrainsof
PRRSV,andtheproductsofRT—PCR couldbeusedtOdistinguishthem.Itwasprovedtobea
fastandaccuratemethodofdetectingPRRSV,whichhadhighsensitivityandgoodspecificity.
Keywords:PRRSV ;variantstrains;classicalstrains;multipleRT—PCR
猪繁殖与呼吸综合征病毒 (Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus,PRRSV)为动脉炎
病毒属 的成员,是一种有囊膜 的单股正链RNA病毒,病毒粒子呈球
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