胃癌中线粒体DNA4977缺失与FBP2异常表达的生物学意义.pdfVIP

2011GISTON论文汇编 吕有勇 北京大学肿瘤医院研究所肿瘤分子生物学实崧室 乏力与消瘦是恶性肿瘤病人常见的临床表现，尤以胃肠道肿瘤患者最为明显。肿瘤细胞的失控性生 长和极度的机体耗能．不仅导致细胞生存微环境的改变．也导致细胞的供能方式发乍，竖化，物质代谢片 式从以有氧氧化为丰转变为以精酵解为丰，肿瘤细胞代谢异常和糖酵解增强的原因十分复杂，其中，线 粮体作为细胞的能量供应站，它所承担的有氧供能发，b障碍可能是t耍原因之一。 肿瘤的发生足一个多基因参与，多步骤发展的复杂过程。乏力与消瘦足恶性肿瘤患者常见的临床表 现，尤以胃肠道肿瘤患静最为明显。肿瘤细胞的失控性生长和极度的机体耗能，不仪导致细胞生存微环 境的改变，也导致细胞的供能方式发生蛮化，物质代谢片式从以有氧氧化转变为以糖群解为土。肿瘤细 胞代谢异常和糖酵解增强的原因十分复杂，其中，线粒体作为细胞的能量供应站，它所承担的有氧供能 发生障碍可能是主要原因之一。另外，糖代谢通路I。的关键酶的差异表达也有助丁解释糖酵解的增强。 关键酶基囡，探对这些基醐的变化在肿瘤的发生发展过程中可能发挥的作用和机翩。 一、胃癌中高频率的mtDNA4977缺失及其临床生物学意义 机体90％的能量是由线粒体通过呼吸链介导的氧化磷酸化作用来提供，然而由于线粒体自身的结构 多种肿瘤组织中都发现该缺失的存在。因此我们推测mtDNA4977缺失可能导致细胞的有氧供能发生障 碍并参‘o细胞的癌变过程．：早期的报道称mtDNA突变随着年龄的增加和肿瘤的发生而增加，而近期的 PCR PAMC82、SNUl、SNU5、SNUl6、RF48缺失频率高于BGC823 未检测到明显的缺失；胃癌组g：的缺失频半明显高于癌旁配对正常组01(户=0045)，分别为796％ (86／108)和67 2011GISTON论文汇编 黏膜作为对照，结果显示正常胃组织的mtDNA4977缺失频率明显低于癌组织和癌旁配对正常组织 (P0．05)，这表明癌旁形态学正常的组织在基因水平已经发生了改变。虽然非癌患者的平均年龄低于 胃癌患者，但是我们的分析没有显示mtDNA4977缺失频率与患者的年龄相关，这也排除了两组患者年 龄差别导致缺失频率差别的可能性。进一步的分析表明mtDNA4977缺失频率与胃癌患者的性别、胃癌 分化、TNM分期、血管侵袭、淋巴结转移和5年生存率等临床病理学特征均无明显相关。这一结果部分 支持了我们的假设，提示mtDNA4977缺失可能与机体的氧化损伤相关，导致细胞的有氧供能障碍。 二、MnSOD、ROS在胃癌中的异常表达及生物学意义 过氧化氢(H：O：)和羟基(OH。)，O：’为带有负电荷的自由基，是氧分子在线粒体中被还原的第一个产 物。正常生理条件下，ROS的产生与细胞的生命活动密切相关，参与细胞代谢、信号传导等过程，02。 与H：O：可生成性质更活泼的OH‘，大量的H：O：、O：一、OH’可使DNA氧化、断裂并能造成生物膜的损伤， 改变细胞的代谢通路、信号传导途径甚至功能，增加了基因组的不稳定性，从而导致细胞中基因变异的 累积和加速细胞的癌变过程。存在于线粒体内的MnSOD是清除ROS的第一道防线，保护线粒体避免受 粒体对氧应激的防御能力和自由基的水平。 为了进一步明确mtDNA4977缺失的生物学作用和分子机制，我们分析比较了不同胃癌细胞系中ROS ROS量增加是造成mtDNA及基因组DNA损伤的因素之一。 以前的研究报道肿瘤组织中MnSOD表达水平较低，但近来研究又表明卵巢癌、胃癌及脑癌中MnSOD 表达水平增高。为了明确胃癌中MnSOD的表达水平，我们运用免疫组化的方法对组织芯片进行检测， 结果显示，胃癌中的MnSOD表达水平明显高于癌旁正常组织，胃炎组织中也有一定程度的高表达。 MnSOD是一种诱导酶，可被ROS、TNF—a、IL_1B等诱导，故而在不同组织及不同肿瘤中可因氧化应 激环境不同而表达各异。我们的结果表明胃癌组织和胃炎组织处于一个较高的氧化应激状态，MnSOD 的上调可能是肿瘤细胞对抗ROS细胞毒作用的一种自我保护机制。但是进一步分析我们并未发现胃癌 组织中mtDNA4977与MnSOD表达的相关性。可能是由于样本量较少所