叶酸联合成体神经干细胞治疗创伤性脑损伤大鼠的实验.pdfVIP

叶酸联合成体神经干细胞治疗创伤性脑 损伤大鼠的实验 刁 波刘 琴王丽萍张 宜 中国人民解放军广州军区武汉总医院医学实验科，武汉 430070 [摘要] 目的 观察叶酸联合成体神经干细胞对创伤性脑损伤大鼠的治疗作用，探讨其可能作用机制。方 法 120只Wistar大鼠随机分为6组，正常组，模型组，假手术组，叶酸注射组，成体神经干细胞移植组，成体神经干 细胞移植+叶酸注射组。倒置显微镜下观察神经干细胞形态学变化；流式细胞仪检测神经干细胞表面标记物 CD105、CD45、CD44、CD29的表达；免疫荧光法检测神经元特异性烯醇酶 （NSE成熟神经元的特异性标志）、胶质纤 维酸性蛋白 （GFAP胶质细胞的标记物）的表达；平衡木实验检测大鼠运动协调与整和能力；Morris水迷宫实验测试 各组大鼠的学习记忆能力；HE染色及Brdu免疫组化实验观察脑组织形态学变化；酶联免疫吸附试验检测大鼠脑 组中脑源性神经生长因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)的表达；蛋白质印迹法检测脑组织中凋亡相关蛋白BCL- 2、Bax、Caspase-3的表达。结果 分离所得细胞能在体外传代培养，流式细胞仪检测发现细胞阳性表达CD44、 CD29,阴性表达CD105、CD45，细胞经胎牛血清诱导分化后能形成NSE或GFAP阳性细胞。实验表明，叶酸与成体 神经干细胞干预创伤性脑损伤大鼠模型后能显著改善其行为学变化，减轻脑组织的炎症反应，恢复受损神经细胞， 增加脑组织内BDNF、NGF的含量，上调BCL-2的表达，下调Bax、Caspase-3的表达。结论 叶酸联合成体神经干细 胞干预创伤性脑损伤大鼠能显著改善中枢神经功能，对维持神经元微环境稳态具有重要的作用。 [关键词] 叶酸；成体神经干细胞；创伤性脑损伤 R322.8 A StudyonFolicAcidCombinedwithAdultNeuralStemCellsinthe TreatmentofTraumaticBrainInjuryinRats DIAO BoLIUQin WANGLi-pingZHANG Yi DepartmentofMedicalExperiment,WuhanGeneralHospitalofGuangzhouMilitary CommandofChinesePLA,Wuhan430070,China [Abstract] Objective Toexplorethefolicacidandadultneuralstemcellsjointinfluencingmechanismonthe ratwithTraumaticBrainInjury,andtofindoutitspossiblemechanism. Methods Divide120ratsto6groups randomly—normalgroup,modegroup,shamoperationgroup,folacininjectiongroup,adultstemcellstransplantgroup, andfolacininjectionplusadultstemcellstransplantgroup.Observethemorphologicalchangeunderthemicroscope,then, doflowcytometrytestanddetecttheexpressionoftheneuralstemcellsfacialnotation—CDl05、CD45、CD44、CD29. Examinetheexpressionofneuronspecialenolase(NSE)andtheexpressionofgelatinousfibreacidicprotein(GFAP)with immunofluorescence.Examinetheratsabilitytomotor-coordinateandconformwithbalancebeam.Testeachgroups learningandmemorizingabilitybyconductingtheMorriswatermazeexperiment.Then,conducttheHEchromosomea