激光共聚焦显微镜研究clpP基因缺失对变形链球菌生物膜耐酸性的影响.pdfVIP

·８０ · 临床口腔医学杂志 ２０１３ 年 ２ 月第 ２９ 卷第 ２ 期 J Clin Stomatol, Ｆｅｂ,２０１３,Vol.２９.No.２ 激光共聚焦显微镜研究 ｃｌｐＰ 基因缺失 对变形链球菌生物膜耐酸性的影响 * 柴红波 １，２ ，周 娟 ２ ，杜姗姗 ２ ，罗志晓 ２ ，叶 丽 ３ （１．武汉大学口腔医学院 湖北 武汉 ４３００７９ ； ２．湖北医药学院附属太和医院口腔科 湖北 十堰 ４４２０００ ； ３．湖北医药学院 湖北 十堰 ４４２０００ ） ［摘要］ 目的：应用激光共聚焦显微镜观察 ｃｌｐＰ 基因对变形链球菌生物膜耐酸性的影响。 方法：将变形链球菌标 准株 ＵＡ１５９ 和它的 ｃｌｐＰ 基因缺陷株分别做成预酸化和致死酸化处理的菌液，接种于刻有宽 ５００ μｍ 深 ５００ μｍ 沟的羟 基磷灰石圆片上厌氧培养 １２ ｈ。 培养后取出圆片，所有圆片均在处理后立刻进行荧光死、活菌斑染色并行共聚焦观察。 测算活菌厚度、面积及荧光强度占总菌斑 的百分 比，应用 ＳＰＳＳ １５．０ 统计软件，采用方差分析及均数两两比较分析 ｃｌｐＰ 基因缺失对细菌生长及耐酸能力的变化。结果：共聚焦显微镜下，ｃｌｐＰ 基因缺失菌株所形成的生物膜菌斑厚度略薄于标 准菌株（Ｐ ＜０．０５），经过预酸化处理和致死酸处理后 ｃｌｐＰ 基因缺失菌株所形成的生物膜菌斑厚度显著薄于标准菌株（Ｐ ＜０．０１），而且活菌百分 比显著低于标准株（Ｐ ＜０．０１）。 结论：共聚焦显微镜下 ｃｌｐＰ 基因可 以显著地降低变形链球菌的耐 酸能力，并一定程度地降低变形链球菌的生长能力。 ［关键词］ ｃｌｐＰ ；变形链球菌 ；生物膜；激光共聚焦显微镜 ［中图分类号］ Ｑ８１２ ［文献标识码］ Ａ ｄｏｉ ：１０．３９６９ ／ｊ．ｉｓｓｎ．１００３－１６３４．２０１３．０２．００７ Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｃｌｐＰ ｏｎ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ａｃｉｄ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｏｆ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ Ｍｕｔａｎｓ． ＣＡＩ Ｈｏｎｇ－ｂｏ１，２ ， ２ ２ ２ ３ ＺＨＯＵ Ｊｕａｎ ，ＤＵ Ｓｈａｎ－ｓｈａｎ ，ＬＵＯ Ｚｈｉ－ｘｉａｏ ，ＹＥ Ｌｉ ． １．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｓｔｏｍａｔｏｌｏｇｙ ，Ｗｕｈａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｕｂｅｉ Ｗｕｈａｎ ４３００７９ ， Ｃｈｉｎａ； ２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｓｔｏｍａｔｏｌｏｇｙ ，Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｔａｉｈｅ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｈｕｂｅｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ，Ｈｕｂｅｉ Ｓｈｉｙａｎ ４４２０００ ，Ｃｈｉ－ ｎａ ； ３．Ｈｕｂｅｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ，Ｈｕｂｅｉ Ｓｈｉｙａｎ ４４２０００ ，Ｃｈｉｎａ． ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ ：Ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｃｌｐＰ ｏｎ ｔｈｅ ａ