狼毒对恶性黑色素瘤细胞生长的影响及其分子作用机制的研究.pdfVIP

LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL．22NO．5 时珍国医国药2011年第22卷第5期 狼毒对恶性黑色素瘤细胞生长的影响 及其分子作用机制的研究 王莉平1…，王义善h，张国营2，刘昆2，段慧英2，马 念3 (1．滨州医学院中西医结合学院，山东滨州264003； 2．烟台大学药学院，山东烟台264005；3．滨州医学院附属医院，山东滨州256603) 摘要：目的通过中药狼毒提取液(LDextrat，LDE)对恶性黑色素瘤B16细胞生长抑制作用的研究，探讨其诱导细胞发生 凋亡的作用机制。方法选用狼毒提取液处理的体外培养的黑色素瘤B16细胞株为研究对象，采用MTT法分别在24，48 和72h测定狼毒提取液对黑色素瘤B16细胞存活率的影响。用Hoechst33258荧光染色法观察狼毒提取液诱导细胞凋 亡的现象以及细胞形态的变化。用Western 毒提取液对恶性黑色素瘤B16细胞的抑制作用随药物浓度的升高而增强并呈现一定的时效和量效关系。狼毒提取液作 用黑色素瘤B16细胞24h后，能诱导恶性黑色素瘤B16细胞的凋亡。Westernblot分析证实狼毒提取液能下调抗细胞凋 亡蛋白Bcl一2的表达水平和上调促细胞凋亡蛋白Bax的表达，从而导致Bcl一2／Bax蛋白比率下调、引起癌细胞凋亡和细 胞存活率降低。结论狼毒提取液下调抗细胞凋亡Bcl一2蛋白和上调促细胞凋亡Bax蛋白的表达、降低Bcl一2／Bax蛋白 比率可能是狼毒提取液诱导肿瘤细胞凋亡、抑制恶性黑色素瘤B16细胞生长重要作用的分子机制。 关键词：狼毒大戟；恶性黑色素瘤细胞；细胞凋亡；Bcl一2／Bax；分子机制 1．05．042 DOI标识：doi：10．3969／i．issn．1008-0805．201 中图分类号：R285．5文献标识码：A 文章编号：1008-0805(2011)05一1133-02 Inductionof in MelanomaCellsLDEanditsMechaniSillS ApoptosisMalignant by WANG Kun‘，DUAN Nian。 Li-ping“3，WANGYi—shan‘+，ZHANGGuo—ying‘，UU Hui—ying‘，MA Medical (1．BinzhouCollege，Binzhou264003，傩ina；2．YantaiUniversity，拖ntai BinzhouMedical 345003，C危ina) HospitaZof Colfege。Binzhou LD cellsandits To theeffectofactionof extract(LDE)onthe of melanoma mech- Abstract：0bjectivestudy growthmalignant tumorlineB16wasevaluatedM1fr．TheLDE—in- anisms．MethodsTheeffectsofLDEonthe ofthemelanomacell growth by duced ofthecancercellsWasdetected withfluorescence were apoptosis bylabeling