冰醋酸在宫颈液基细胞学制片中的应用研究.pdfVIP

宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，其发病率在女性恶性肿瘤中居第二位，严重威胁着女性的身体 健康和生活质量…。宫颈病变筛查是防治宫颈癌的重要手段，巴氏涂片作为传统的宫颈癌筛查方法，因其 制片质量差、敏感度低、假阴性率高等已不能满足当前健康水平的需要。近年来，新柏氏薄层细胞学检测 CytologicTest，TCT)作为妇科宫颈细胞检查方法已经被l临床逐渐接受，由于其涂片背景 系统(Thinprep 干净、细胞种类分明、结构层次清晰等，使其敏感度和阳性率较传统巴氏涂片显著提高，这主要归功于TCT 优良的制片质量隔31。但在实际工作中，并不能保证每张涂片都能做到优良。T(1制片的质量除与试剂和 制作方法有关外，主要取决于送检标本的质量。若标本瓶中含有大量血液或粘液，就很难制出高质量的涂 片。我们在TCT制片工作中，摸索出一种提高TCr制片质量的方法，现将该方法具体介绍如下。 1材料与方法 1．1材料无水乙醇(AR安徽安特生物化学有限公司)、冰醋酸(AR北京化工厂)、改良的巴氏染液， 宫颈液基细胞学的耗材(包括宫颈刷、离心棒、过滤器、标本瓶和保存液)由南京东大迪艾基因技术有限 DAZP-06)，振荡器(KoreaVortexor)等。 公司提供，自动制片机(Sunray 1．2方法 1．2．1试剂配制将等量无水乙醇和蒸馏水相混，即配成50％的乙醇，然后取50％乙醇9份与l份冰醋酸相 (VⅣ)。 1．2．2涂片制备(1)将妇产科行宫颈液基细胞学检查的标本分成正常组(肉眼观无血液或粘液污染)、血 心管中，分别加入三倍体积的保存液，于振荡器振荡2min，等量分装于四个保存瓶中。(3)取正常组、血 性组和粘液组标本保存液各一瓶置于自动制片机上制片，作为对照组。(4)在血性组和粘液组的各3瓶保 自动制片机上制片。(5)所有标本制片后行改良巴氏染色，光学显微镜观察染色情况。 2结果 2．1 肉眼观察结果 (1)液基细胞学检查正常组标本的颜色为无色或半透明状，仅有细小的颗粒状物悬 浮在保存瓶的下三分之一处；血性组标本的颜色为暗红色、灰褐色或咖啡样色，保存液三分之二以下处有 大量片状、絮状物悬浮，底部可见灰褐色颗粒状物沉积；粘液组标本的颜色下部呈乳白色，上部为半透明 状，偶见成团的粘液浮于其中，保存液中有大量石灰样白色悬浮物，主要集中在保存液的中下部，底部可 见大量灰白色颗粒沉积。(2)正常组标本制作的涂片厚薄均匀，无空白和团块堆积，涂片呈匀质半透 明状；未处理的血性组和粘液组标本制作的涂片厚薄不均，常见空白和团块堆积，涂片染色斑驳不均； 处理后的血性组和粘液组标本涂片在制片质量上与正常组相差不大，只是颜色略有不同：经冰醋酸处理后 制作的涂片颜色呈浅棕红色，经50％乙醇冰醋酸(9：1)处理后制作的涂片颜色呈淡蓝色，见图l。 2．2镜下观察结果正常组标本制作的涂片在镜下细胞分布均匀，大部分细胞单层平铺，细胞周围无 裂解物附着，背景干净，红蓝黄对比较清晰，见图2；血液组标本制作的涂片厚薄不均，背景不干净， 细胞周围有大量裂解物附着，红蓝黄对比不清晰，见图3；未处理的粘液组制作的涂片细胞分布不均 匀，细胞重叠较多，部分细胞呈团块状或条索状排列，细胞周围有少量裂解物附着，背景尚干净， 红蓝黄对比尚清晰，见图4；经50％7,醇冰醋酸(1：1)处理后的血性组和粘液组制作的涂片在质量最 接近正常组，见图5和图6。经冰醋酸处理后的血性组和粘液组标本在制片质量上与正常组相差不大，不 同的是经冰醋酸处理后制作的涂片细胞染色异常，大部分细胞红染严重，见图7；经50％乙醇冰醋酸(9：1) 处理后制作的涂片细胞分布欠均匀，部分细胞重叠，细胞周围有少量裂解物附着，细胞染色异常， 大部分细胞蓝染严重，见图8。 3讨论 宫颈癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤，近年来由于生活习惯及检测手段的提高，其发病率逐年提高 并趋于年轻化。宫颈癌的发生发展是一个漫长的过程，从宫颈癌癌前病变发展到宫颈癌大约10年左右。 世界卫生组织指出宫颈癌是目前唯一病因明确、有望早诊断、早治疗、早灭绝的癌症。对宫颈癌的筛查已 从传统意义上的早期发现宫颈癌转变为以早期检出高级别CIN(cervical intraepithelial 进行阻断性治疗为目的，宫颈癌的筛查手段也层出不穷，宫颈液基细胞学的出现，使宫颈癌和宫颈癌前病