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- 2015-08-30 发布于重庆
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A549细胞培养方案——适用于各种细胞培养.doc
A549细胞的培养
A549细胞为人肺腺癌细胞,属于传代细胞系,可稳定地传代培养。一般用胰酶消化后,加入生长液稀释,以1:2~1:3传代培养都是可行的。
一、 [所需溶液]
细胞冲洗液:磷酸盐缓冲液(PBS)——无Ca、Mg
NACL 8.00g;
KCL 0.20g;
KH2PO4 0.20g;
Na2HPO4 .。12H2O 1.15g
加水至 1 000mL,将PH调至7.4,高压灭菌。
消化液
胰酶-PBS
结晶胰酶 2.5g;
高压灭菌后的PBS 1000ml
用磁力搅拌器搅拌均匀,使其完全溶解,通过0.22μm的滤膜过滤除菌,分装备用,放置—20℃保存。
胰酶—EDTA:
结晶胰酶 0.5g;
EDTA盐溶液 0.2g
无Ca、Mg PBS 1 000ml
用磁力搅拌器搅拌均匀,使其完全溶解,通过0.22μm的滤膜过滤除菌,分装备用,放置—20℃保存。
细胞培养液:RP
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