黄芩素分子印迹整体柱的制备的研究.pdfVIP

2013年《药物分析杂志》优秀论文评选交流会论文集 一173一 中含有1个羧基，活化羧基的方法主要有混合酸酐法、活性酯法及碳二亚胺法。其中活性酯法具有交叉反应 少、副产物少、抗体特异性强等优点¨81。因此本实验采用NHS活性酯法，首先将BAL的羧基活化，即在缩合 脱水剂DCC作用下，生成黄芩苷的NHS活性酯；然后此活化酯与载体蛋白BSA的氨基反应形成新的酰胺 键，构建获得BAL与BSA的完全抗原BAL—BSA。 目前对于合成的完全抗原的鉴定方法有很多，如紫外光谱扫描法¨9。、同位素标记的半抗原示踪法Ⅲo、 凝胶电泳【1 价。经红外吸收光谱图谱分析，表明BAL的羧基基团与BSA的游离氨基通过形成新的酰胺键而偶联形成 BAL—BSA复合物。 半抗原与载体的偶联比是影响完全抗原免疫原性的重要因素，进而决定着针对半抗原的高特异性、高效 价抗体的制备。但是同种半抗原与不同载体的偶联存在着最佳的分子结合比瞄J，有文献报道连接到BSA 上的半抗原数以l一30为宜。低偶联比的完全抗原可获得高亲和力的抗体，但引起的免疫反应较慢；高偶联 比可以增强免疫反应的强度和效价，但会影响抗体的活性和特异性，并且产生的抗体亲和性较低Ⅲ埘J。本 法检测结果显示，采用该完全抗原免疫家兔后获得了高效价、高特异性的抗BAL的多克隆抗体，抗血清的效 有良好的BAL反应原性和免疫原性。本实验中制备的抗BAL多克隆抗体，为BAL免疫分析检测试剂盒的 开发提供了技术基础，也为后续深入研究BAL的免疫检测技术及快速检测技术奠定了基础。 参考文献(略) (本文发表于《药物分析杂志)2012，32(5)：738) 黄芩素分子印迹整体柱的制备研究 杨清清1，李娟2，狄斌2…，苏梦翔2，严方2’3 (1．江苏省食品药品检验所，南京210008；2．中国药科大学药物分析教研室，南京210009； 3．药物质量与安全预警教育部重点实验室，南京210009) 摘要目的：制备黄芩素分子印迹整体柱并研究其特异识别能力。方法：以黄芩素分子为模板，甲基丙烯酸(MAA)为功能单 合成黄芩素分子印迹整体柱，并考察了印迹整体柱在不同有机相中对黄芩素与汉黄芩素的识别能力，以及流速、柱温对保留 因子与分离因子的影响。结果：模板分子与功能单体之间的比例以1：6为最佳，得到的分子印迹整体柱对模板分子具有特异 的识别能力，黄芩素和其结构类似物汉黄芩素达到较好的分离。结论：合成的印迹整体柱对模板分子具有很强的亲和力和良 好的识别能力，可以用做黄芩素的分离材料。 关键词：分子印迹整体柱；黄芩素；汉黄芩素；原位聚合法 ofbaicalein monolithiccolumns Preparation molecularlyimprinted YANG Juan2，DIBin2…，SU Qing—qin91，LI Meng—xian92，YANFan92’3 InstituteforFoodand (1．Jiangsu DrugControl，Nanjing210008，China； ofPharmaceuficM Pharmaceutical 2．Department Analysis，China University，N肌jing210009．China； Controland 3．KeyLaboratoryofDrugQuality Pharmacovigilance，MinistryofEducation，Nanjing210009，China) Abstract abaicalein monolithiccolumnand its Objective：Toprepare molecularly