SH-SY5Y细胞高表达糖原合成激酶3β对tau蛋白磷酸化和微管稳定性的影响.pdfVIP

·254· 【文章编号】1000—4718【2009)02—0254—05 SH—SY5Y细胞高表达糖原合成激酶313对tau蛋白 磷酸化和微管稳定性的影响木 沈杰1， 陈晓春1△，林旭2， 张静1 (福建医科大学1附属协和医院神经科，神经生物学研究中心，2分子医学研究中心，福建福州350001) 【摘要] 胞模型，观察GSK313高表达对宿主细胞tau蛋白磷酸化、微管稳定性的影响。方法：构建GSK3B真核表达质粒，转 tau蛋白、微管蛋白乙酰化水平的变化情况。结果：GSK313真核表达质粒转染SH—SY5Y细胞36h后，GSK313在 SH—SY5Y细胞中的表达达到高峰，tau蛋白Setl耕凇、，nlPl、rnl一等位点的磷酸化水平在转染后48h达到高峰； tau蛋白总量未有明显变化。转染后60h，微管蛋白乙酰化水平明显减低。结论：高表达GSK313的SH—SY5Y细胞 可使tau蛋白的磷酸化水平增高，从而降低tau蛋白结合和稳定微管蛋白的能力，导致微管蛋白乙酰化水平明显减低。 【关键词]糖原合成激酶3B；tau蛋白质类；磷酸化；微管蛋白 [中图分类号】 R592 [文献标识码]A kinase一3beta enhancestau Glycogensynthase oVerexpression protein andattenuatestubulin inSH·--SY5Ycells phosphorylation acetylation SHEN Jie‘。CHENXiao—chunl．LINXu。，ZHANG Jin91 Center Union CenterMolecular Medical (1 ofNeurobiology，TheAffiliatedHospital，2of Medicine，FujianUniversity，Fuzhou 350001，China．E—mail：chenxc998@sohu．com) AIM：Toconstruct SH—SY5YcellsandtOobservetheeffectsof [ABSTRACT] GSK313一overexpressed GSK313 ontau andtubulin inSH—SYSY 一overexpressionprotein acetylation engineeredeeHs．METHODS：The phosphorylation eDNAof constructwassubclonedintomammalian vector ofthe con- GSK313 expressionpBudCFA．1．TheintegrityGSK313 structWasconfirmed Was transfectedintoSH—SY5Yeels bysequenceanalysis．GSK313transiently usingLipo- fectamine2000．WesternWasusedtomeasuredlevelsof and blotting protein GSK313phosphorylatingGSK39，a8well硒， totaltauand tau and after the