五子降糖方对T2DM大鼠骨骼肌IRS-1、p-IRS-1、PTP1B蛋白表达影响.pdfVIP

324 响 王亚。1，喇孝谨，邱昌龙李继安△ (河北联合大学中医学院063000) 摘要：目的：探讨五子降糖方对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛素抵抗的改善作用及其作用 机制。方法：高脂饮食喂养联合腹腔注射小剂量链尿佐菌素建立T2DM大鼠模型，给予五子降 糖方干预，检测T2DM大鼠血糖及空腹C肽水平，评估五子降糖方对T2DM大鼠胰岛素抵抗指 Blot法观察五子降糖方对T2DM大鼠骨骼肌组织胰岛素受体底物1 数的改善作用；western (IRS一1)酪氨酸磷酸化水平及蛋白酪氨酸磷酸酯酶lB(PTPlB)蛋白表达的影响。结果：五子 降糖方能够显著降低T2DM大鼠血糖水平，升高c肽水平，降低胰岛素抵抗指数；显著增强T2DM 大鼠骨骼肌IRs一1蛋白表达及其酪氨酸磷酸化水平，显著降低PTPlB蛋白表达水平。结论：五 子降糖方对丁2DM大鼠胰岛素抵抗具有改善作用，其机制与增加T2DM大鼠骨骼肌IRs一1蛋白 表达及其酪氨酸磷酸化水平，降低P’rPlB蛋白表达有关。 关键词：五子降糖方；胰岛素抵抗；血糖；c肽；胰岛素受体底物一l；PTPlB 胰岛素抵抗(InsuIin 2DiabetesMeIlitus， Resistance，IR)是2型糖尿病(Type T2DM)重要的病理基础，增强胰岛素敏感性，提高其生物学效应是治疗2型糖尿 病的有效途径。骨骼肌是胰岛素生物利用的主要靶器官，骨骼肌胰岛素受体后信号 转导中任何一个或数个环节的异常均可发生IR【l-2]，因此，调节受体后胰岛素信号 转导是改善IR的重要分子机制。我们文献研究发现，肾虚、痰浊或为2型糖尿病 的基础病机，依此我们确立了补肾气，化痰浊的基础治则，根据古今文献及药理研 究拟定了王￡子降糖方，本实验观察了该方对T2DM模型大鼠糖代谢的改善作用及对 胰岛素抵抗、骨骼肌IRS．1蛋白表达及其酪氨酸磷酸化水平及PTPlB蛋白表达的影 响，初步探讨其药理作用机制，现报道如下： l材料 31第一作者：王亚，女，汉族，河北联合大学中医学院研究生，主要从事中医糖脂代谢疾病研究 通讯作者：李继安．男，汉族，博士，河北联合大学中医学院教授，主要从事中医糖脂代谢疾病研究。电话 0315-3726292，邮箱：lnyy@vipsina_com． 325 MYlODxK07，室温20℃，相对湿度45％，光暗周期(12h／12h)。 1．2药物菟丝子、女贞子、紫苏子、莱菔子、车前子购于北京同仁堂唐山连锁药 店有限公司，由河北联合大学药学院劳风云教授鉴定为正品，按3：3：2：2：2的 比例混合提取备用。盐酸二甲双胍片(500mg／片)，上海中美施宝有限公司(批号 国药准字。 1．3试剂 ELIsA试剂盒，上海江莱生物科技有限公司(批号96T／48T)；兔抗大鼠p—IRs—l (Tyr895)，美国cell signaling 国cell signaling 标记的山羊抗小鼠二抗(批号A0216)。 1．4主要仪器IKA．T10 basic均浆机(美国IKA公司)；低温高速离心机R134A(德 国Eppendof公司)；InfiniteF50酶标仪(瑞士Tecan集团公司)；多功能电泳仪(北 X感光胶片(日本Kodak公司)。 2方法 2．1大鼠2型糖尿病模型制备与分组70只Wistar雄性大鼠适应性喂养1周，随机 抽取l0只作为正常组(c组)，给予普通饲料喂养。其余60只大鼠给予高脂饲料(购 自北京华阜康生物科技股份有限公司)喂养6周后，分两次小剂量STz溶液腹腔注 射，以空腹血糖≥11。1mmo卜L．1、餐后血糖≥16．7mm01．L．1为成模标准【3】，共成 模54只，排除餐后血糖≥30．0mmo卜L．1的4只，将其余50只随机分为：五子低、 中、高剂量组(WD，WZ，WG组)、二甲双胍组(D组)、模型组(M组)，每组lO只。 2．2给药及取材分组后，各组大鼠分别灌胃(ig)相应的药物，给药剂量按大鼠 与人的换算公式计算【9】，灌胃量为7．5mL·(kg-d)．1。模型组及正常组灌胃纯净水； 二甲双胍组灌胃0．19·