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G290104微紫青霉菌(Penicilliumjanthinellum)PtypeATPase及金属硫蛋白相关基因的克隆.pdf
基因组学与应用生物学，2010 年，第29 卷，第1 期，第 17-23 页
Genomics and Applied Biology, 2010, Vol.29, No.1, 17-23
研究报告
A Letter
微紫青霉菌(Penicilliumjanthinellum) P-type ATPase 及金属硫蛋白相关基
因的克隆
陈小玲 潘建龙 王亮 樊宪伟 李有志*
广西大学生命科学与技术学院, 广西亚热带生物资源保护利用重点实验室, 微生物及植物遗传工程教育部重点实验室, 南宁, 530005
* 通讯作者, dyzl@
摘 要 本研究以高抗多种重金属盐的微紫青霉菌(Penicilliumjanthinellum)菌株GXCR 为材料构建基因
。
组fosmid 文库。其插入片段集中在36~50 kb，含13 348 个克隆，重组率为 100%，大约覆盖了GXCR 基因
组的 14.83 倍。基于序列特异性和简并引物，利用PCR 扩增分析了与酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)重
流
金属盐抗性相关的 和 基因；基于兼并引物和序列特异性引物，利用PCR 扩增分析了GXCR 的
CRS5 CUP2
P-type ATPase 基因。通过菌落原位杂交和Southern blot 鉴定了一个含铜转运P-type ATPase 基因的阳性
交
fosmid 克隆，经亚克隆测序分析表明该基因与棒曲霉(Aspergillusclavatus 菌株) NRRL1 的P-type copper
ATPase 相似性达97% 。没有筛选到与 和 基因同源的克隆，说明GXCR 中可能不存在与酿酒
酵母 和 高度同源的 CRS5 CUP2 供 g
CUP2 CRS5 MT 基因，同时也暗示酵母与丝状真菌的重金属盐的抗性机制有本质上的
r
差异或者独特性。 仅 o
关键词 微紫青霉菌, 抗重金属盐, 杂交, P-type ATPase .
, o
i
Coloning of P-type ATPase and Metallothionein Genes from Penicillium
b
janthinellum 有 i
h
Chen Xiaoling Pan Jianlong Wang Liang Fan Xianwei Li Youzhi *
所
College of Life Science and Technology, Guangxi University, Guangxi Key Laboratory of Subtropical Bioresource Conservation and Utilization, The
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