凝胶色谱法分离纯化棉籽低聚糖和蛋白.pdfVIP

第28 卷第3 期 高 校 化 学 工 程 学 报 No.3 Vol.28 2014 年 6 月 Journal of Chemical Engineering of Chinese Universities June 2014 文章编号：1003-9015(2014)03-0503-07 凝胶色谱法分离纯化棉籽低聚糖和蛋白 刘 聪, 鲍宗必, 邢华斌, 杨亦文, 苏宝根, 任其龙 (浙江大学生物质化工教育部重点实验室, 浙江大学 化学工程与生物工程学系, 浙江 杭州 310027) 摘 要：棉籽低聚糖是一种功能性低聚糖，可应用于食品、化妆品、医疗等方面。目前，棉籽低聚糖与蛋白的分离是 最大的技术难点之一。作者研究了棉籽低聚糖和蛋白的凝胶色谱法分离。以棉籽糖和牛血清白蛋白混合溶液为原料， 采用Sephdex G-10、Sephdex LH-20 和Toyopearl HW-40C三种不同凝胶制备柱为固定相，考察了凝胶种类、温度、流动 相组成、进样浓度等因素对分离的影响，确定了适宜的工艺操作条件：以去离子水为流动相，HW-40C凝胶为固定相， 柱温40°C，上样浓度100 mg⋅mL− 1，进样体积1 mL，流速为1.82 BV⋅h− 1 。在该工艺条件下，脱脂棉粕提取液经凝胶色 谱分离可得到纯度达 89.1%的棉籽糖，收率为 64.8% 。本方法具有操作简便，分离效率高，产品质量好，为棉籽低聚 糖和棉籽蛋白的制备研究提供了一种新的方法。 关键词：凝胶色谱法；低聚糖；蛋白；HW-40C 凝胶；棉籽糖；牛血清白蛋白 中图分类号：TQ464.1 文献标识码：A DOI ：10.3969/j.issn.1003-9015.2014.03.011 Separation and Purification of Raffinose and Proteins by Gel Permeation Chromatography LIU Cong, BAO Zong-bi, XING Hua-bin, YANG Yi-wen, SU Bao-gen, REN Qi-long (Key Laboratory of Biomass Chemical Engineering of Ministry of Education, Department of Chemical and Biological Engineering, Zhejiang University, Hangzhou 310027, China) Abstract: Raffinose is a functional oligosaccharide that can be used in food, cosmetics and organ transplant engineering. Currently, the separation of raffinose and proteins is a problem. Gel permeation chromatography was used to separate raffinose and BSA, and factors such as gel packing type, temperature, mobile phase composition and feed concentration were investigated. An optimized chromatographic condition was using Toyopearl HW-40C as the stationa