副猪嗜血杆菌单因子血清的制备.pdfVIP

动物医学进展，2014，35(7)：21—24 in Medicine Progress Veterinary 副猪嗜血杆菌单因子血清的制备 路明华1’2，王雪敏2“，李淑芳1，路迎迎1’2，张培君1，龚玉梅1，王宏俊¨ (1．北京市农林科学院畜牧兽医研究所，畜禽疫病防控技术北京市重点实验室，北京100097； 2．河北工程大学农学院，河北邯郸056021；3．河北省禽病工程技术研究中心，河北邯郸056021) 摘要：利用副猪嗜血杆茵(Hps)的15个血清型的参考茵株分别制备相应的兔抗血清，然后对抗血清 进行交叉吸收试验，得到15个血清型的单因子血清，不同血清型的单因子血清不与其他血清型抗原发生反 应。应用这15种单因子血清对临床分离到的9株副猪嗜血杆茵进行血清型的鉴定，结果表明，其中6株为 5型，2株为4型，1株为7型。 关键词：副猪嗜血杆茵；单因子血清；制备 中图分类号：S852．613 文献标识码：A 副猪嗜血杆菌(HnPmo加iZ“s以，．口5“is，Hps)属 1材料与方法 于巴斯德菌科(Pasteurellaceae)嗜血杆菌属 1．1材料 (Hnmo砷iZ“s)，为革兰阴性细小杆菌，具有多种形 1．1．1菌株副猪嗜血杆菌15个血清型的参考菌 态，定植于健康猪上呼吸道，属于正常菌群，在免疫 株来自澳大利亚昆士兰州动物研究所，由本实验室 dis— 抑制等特定条件下会引起猪格氏病(Glasser’s 保存。 ease)[1‘2]，以纤维素性多发性浆膜炎、脑膜炎、关节 1．1．2培养基 固体培养基为加入50mL／L小牛 炎为主要特征。近些年来由于猪场规模化养殖的快 血清和10g／LNAD的TSA平板；TSB液体培养基。 速发展，尤其是工厂集约化养殖，猪格氏病已经呈世 1．1．3 0．01 溶液、试剂 mol／LPBS、硫柳汞和甲 界性流行和暴发，表现出突然死亡率、发病率和病死 醛为中药集团产品；弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂 率较高，严重危害养猪业发展，并造成巨大经济损 为Sigma公司产品；2×PCRMix为天根生化科技 失m]。 有限公司产品。 由于副猪嗜血杆菌(Hps)体外难以培养，直到 1．1．4 主要仪器设备 1922年Schermer和Ehrlich才成功地分离到该菌。 20世纪70年代，研究证明了Hps在体外培养过程 电泳仪为北京六一仪器厂产品；琼脂糖凝胶成像系 中只依赖V因子，即烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 统为美国SIMBIO公司产品。 (NAD)，而不需要正铁血红素(X因子)，并将此菌 1．2方法 更名为副猪嗜血杆菌[5。6]。 Kielstein 1．2．1抗血清的制备①抗原的制备：将一80℃ P等H3在1992年用琼脂免疫扩散