HPLC法测定桔梗药材中桔梗皂苷D的含量.pdfVIP

江西中医药2014年2月第2期总45卷第374期 有开宣肺气，祛痰排脓之功效 J。临床上用于治疗 2．1 色谱条件 色谱柱：PhenomenexLunaCl8色谱 咳嗽痰多，胸闷不畅，咽痛，音哑，肺痈吐痰，疮疡脓 柱(250mm×4．6ram，5txm)；流动相A：0．1％磷酸溶 成不溃等症_2]。主要化学成分为齐墩果酸型五环 液，流动相B：乙腈，按表 1进行梯度洗脱；流速 ：0． 三萜皂苷，桔梗皂苷 A、桔梗皂苷 B、桔梗皂苷 D 5mlMmin；柱温 ：3O℃；进样量 101xL；检测波长为 等，其他尚含有黄酮、聚炔、甾体、酚酸、脂肪酸等类 2lOnm 。 型的化合物。现代研究表明，桔梗的主要活性成分 表 1 梯度洗脱程序 为桔梗皂苷类成分，具有祛痰、抗炎、降低毛细血管 通透性、抑制佐剂性关节炎 、以及松弛肠道平滑 肌、抗肿瘤 等多方面的生物活性 。本实验通过 HPLC建立 了桔梗中桔梗皂苷 D含量测定的方法 。 1 材料与仪器 Agilent1100高效液相色谱系统，配 DAD检测 2．2 供试品溶液的制备 精密称定干燥桔梗粉末 器(Agilent公司，美国)，Milli—Q超纯水仪 (Milli— (过三号筛)适量，置具塞锥形瓶中，精密加入 50％ pore公 司，美 国)、PhenomenexLunaCl8色谱柱 、 甲醇 30mL，超声 30min，滤过；滤渣置具塞锥形瓶 BSA124S天平(Sartorius)。 中，精密加入 50％甲醇30mL，超声30min，滤过；合 乙腈(色谱纯，TEDIA)、磷酸 (分析纯，天津市 并续滤液，于水浴中蒸干至50mL以下，用 甲醇定容 永大化学试剂有限公司)、超纯水、桔梗皂苷D标准 至50mL，续滤液过0．221xm微孔滤膜，备用。 品(中国药品生物制品检定所 111851—201204)、桔 2．3 对照品溶液的制备 精密称取桔梗皂苷 D对 梗标准药材 (中国药品生物制品检定所 121028— 照品适量，用 甲醇溶解并稀释成0．24mg／mL的溶 201210)、桔梗药材分别购于某市的各大药店及药 液 ，即得 。 材市场 ，经江西中医药大学张文惠教授鉴定均为桔 2．4 线性关系的考察 分别量取对照品储备液5， · 59 · JIAINGXIJOURNALOFTRADITIONALCHINESEMEDICINE 2，1，0．5mL，分置 10mL量瓶中，用 甲醇稀释至刻度 ， 表 6 13个桔梗药材样品中桔梗皂苷D的含量 摇匀，0．22I．rn微孑L滤膜滤过；精密吸取上述溶液及 储备液各 10L注入色谱仪，记录色谱 图。以峰面积 (y)对溶液浓度 ()进行线性 回归。结果表明桔梗 皂苷 D在0．06—2．41xg范围内，峰面积具有 良好的 线性关系，其同归方程为：Y=2984X一3．5993，r=0． 9999色谱图见图1—2。 一 ! ! ； i ：… 一 ～一、—一～…… ——～ ～ ～ ～…～…～ ～… ～ 图 1 桔梗皂苷 D对照品的色谱 图 一!～一； ……～一一…一一…一…～～一～一} { { 4 讨论 、 一 I 一 4．1 考察 了不同提取方法 (超声提取 、加热回流提 一