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湖南医科大学学报
( )
1998, 23 4
BULL. O F HUNAN M ED. UN IV. 403
正交设计直观分析法优化 PCR 条件①
何正文 刘运生 陈立华 曹美鸿
( 附属湘雅医院神经外科 长沙 410008)
夏家辉
( 医学遗传学国家重点实验室 长沙 410078)
提要 介绍一种 PCR 最优化方法, 即正交设计直观分析法, 旨在摸索 PCR 的最佳实验条件。结果证
明该法科学而简便, 适用于 PCR 实验。
关键词 正交设计; 聚合酶链反应; 方法
中国图书分类号 331
R
聚合酶链反应(po lym erase chain reaction , 表2 PCR 正交试验设计表[L 9 (34 ) ]
PCR ) 是近十余年来发展起来的体外基因扩增 因 素
方法, 由于其经济、快速、实用而在科研及临床 实验〗次数 M g2+ dN T P p rim er T aq 酶
方面有着广泛应用前景, 并逐渐有取代传统分 ( - 1) ( - 1) (pmo l) (U )
mmo l L mo l L
子杂交方法的趋势。然而, 作为科研采用 PCR 1 10 500 50 10
方法, 实验条件的摸索是一大难题, 尤其当遇到 2 10 1000 100 15
扩增片段较长, 片段 - 含量高时更为困难。 3 10 200 0 150 2 0
G C
[ 1 ] 4 15 500 100 2 0
为此, 已有人 应用正交法优化实验条件。但此
法进行很多的数理运算, 对于临床研究者似不 5 15 1000 150 10
6 15 200 0 50 15
实用且费时。本文作者参考其方法, 改良为正交
7 2 0 500 150 15
设计直观分析法优化 PCR 条件, 现总结如下。 8 2 0 1000 50 2 0
1 材料与方法 9 2 0 200 0 100 10
11 标本收集与
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