人伤寒沙门菌Ty21a菌蜕的制备.pdfVIP

中国人兽共 患病 学报 2O11，27 (6) ChineseJourna1ofZoonoses 479 文章编号 ：1002—2694(2011)06—0479—05 人伤寒沙门菌Ty21a菌蜕的制备* 温 晶，寇志华 ，于 虹 ，吕兴茹 ，王 欣，郭 彦 ，俞建萍，赵光宇，周育森 摘 要：目的 探讨利用噬菌体 PhiX174E基 因制备人伤寒沙 门菌 Ty2la菌蜕 的可行性以及适 当制备条件 。方法 将 PhiX174E基因克隆至温控表达系统，筛选获得裂解效率较高的质粒pMBE，通过优化转化方法将 pMBE导入 Ty21a，利用温 控表达系统进行 Ty21a菌蜕制备。菌落计数计算菌蜕裂解效率 ，并通过扫描 电镜和透射电镜观察其形态结构 。结果 裂解 质粒 pMBE介导大肠杆菌 DH5a的裂解效率达 99．99 ；通过 电击转化方法获得重组 Ty21a(pMBE)，利用温控表达系统成功 制备 Ty21a菌蜕，裂解效率达 96．77 。电镜观察菌蜕结构完整并呈空泡状结构，并能看到溶菌孔道 。结论 PhiX174E基 因