富含多酚类植物RN A提取的研究进展.pdfVIP

２０１５ 年 第２９卷 第１期　　　　　　　　　　　　　　　作 物 研 究　　　　　　　　　　　　　　　 ９１ 富含多酚类植物 ＲＮＡ提取的研究进展 刘　芳，官春云* （湖南农业大学农学院／国家油料作物改良中心湖南分中心，长沙４１０１２８） 摘　要：植物体内广泛存在多糖、多酚等次生代谢物，由于其易被氧化，且难以与核酸分离，导致了 ＲＮＡ 提取困 难。针对植物多酚类化合物的结构及生物学特性进行分析，将现有的ＲＮＡ提取方法进行分类，并对它们的原理及 优劣进行了论述与评价。 关键词：植物；ＲＮＡ提取；多酚；ＣＴＡＢ－ＬｉＣＬ法；ＳＤＳ－酸酚法 中图分类号：Ｑ９４６.２　　　　文献标识码：Ａ 文章编号：１００１-５２８０（２０１５）０１-００９１-０５　　　　ＤＯＩ：１０.３９６９／ｊ.ｉｓｓｎ.１００１-５２８０.２０１５.０１.２２ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｎ ＲＮＡ Ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ Ｆｒｏｍ ＰＩａｎｔｓ Ｒｉｃｈ ｉｎ ＰｏＩｙｐｈｅｎｏＩｓ ＬＩＵ Ｆａｎｇ，ＧＵＡＮ Ｃｈｕｎ-ｙｕｎ* （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＡｇｒｏｎｏｍｙ／Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｏｉｌｓｅｅｄ Ｃｒｏｐｓ Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ Ｃｅｎｔｅｒ ｉｎ Ｈｕｎａｎ， Ｈｕｎａｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ，Ｈｕｎａｎ４１０１２８，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ａｎｄ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ ａｒｅ ｗｉｄｅｌｙ ｆｏｕｎｄ ｉｎ ｐｌａｎｔｓ，ｗｈｉｃｈ ａｒｅ ｓｕｓｃｅｐｔｉ- ｂｌｅ ｔｏ ｂｅ ｏｘｉｄａｔｅｄ ａｎｄ ｄｉｆｆｉｃｕｌｔ ｔｏ ｂｅ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ，ｗｈｉｃｈ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎ ｄｉｆｆｉｃｕｌｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｏｆＲＮＡ.Ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ，ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ，ｔｈｅ ｅｘｉｓｔｉｎｇＲＮＡ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｗｅｒｅ ｃｌａｓ- ｓｉｆｉｅｄ，ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ ａｎｄ ａｄｖａｎｔａｇｅｓ ａｎｄ ｄｉｓａｄｖａｎｔａｇｅｓｗｅｒｅ ｅｖａｌｕａｔｅｄ. Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｌａｎｔ；ＲＮＡ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ；ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ；ＣＴＡＢ－ＬｉＣＬ ｍｅｔｈｏｄ；ＳＤＳ－ｐｈｅｎｏｌ ｍｅｔｈｏｄ 　　ＲＮＡ，即Ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ，是一种极为重要的 提出的异硫氰酸胍 －酚 －氯仿一步法，即 Ｔｒｉｚｏｌ 生物大分子物质。它能够传递遗传信息，是ＤＮＡ参 ［２］ 法 。由于其高效简洁，在动植物细胞ＲＮＡ提取上 与蛋白质合成的重要媒介。任何基因功能的有效发 广泛运用，但无法提取富含多酚类植物组织总 挥均依赖ＲＮＡ 的表达与调控，所以ＲＮＡ 在分子生 ［３］ ＲＮＡ 。多酚是植物细胞中的一类次级代谢物，其 物学研究领域占有重要地位。 ［４］ 种类繁多，结构各异，含量仅次于纤维素 ，因其具 高质量的ＲＮＡ提取是进行分子生物学实验的 有多个酚基团而得名。多酚易被氧化形成醌类物质 必要前提，如 ｃＤＮＡ 文库的构建、荧光定量 ＰＣＲ检