丹皮药材的高效液相色谱质谱／质谱研究.pdfVIP

维普资讯 第 33卷 分析化学 (FENXIHUAXUE) 研究报告 第 ll期 2005年 l1月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry 1555～1559 丹皮药材的高效液相色谱一质谱 ／质谱研究 梁琼麟 温华珍 ’ 王玉莉 罗国安 ， 王义明 (清华大学化学系，北京100084) (江西中医学院药学系，南昌330006) 摘 要 采用高效液相色谱．质谱／质谱建立了丹皮药材的指纹图谱方法。丹皮药材中的主要成分得到较好 分离，指纹峰重现性好 ，通过多维联用技术获得各指纹峰的保留时间、分子量及结构信息，推测出15个指纹峰 的可能组成。结果表明：所建立的丹皮指纹图谱信息量丰富，对丹皮药材的化学表征及质量评价有重要的参 考价值。 关键词 丹皮，高效液相色谱．质谱／质谱，指纹图谱 1 引 言 丹皮是毛茛科植物牡丹 (PaeoniasuffruticosaAndr．)的干燥根皮，产于安徽、山东、甘肃、四川等地， 其味辛、苦，性凉，有清热、凉血、和血、消瘀的功效，可治疗热入血分、吐血、阑尾炎初起及跌打损伤 等 】。现代药理研究表明，丹皮不仅用作镇痛剂、解痉药、抗炎剂 [3】，而且常配合不同的中药制剂用于 治疗血液循环障碍性疾病 】。丹皮药效成分有丹皮酚(paeono1)、牡丹酚原苷 (paeonolide)、牡丹酚苷 (paeonoside)、芍药苷(paeoniflorin)、羟基芍药苷 (oxypaeoniflorin)、苯甲酰芍药苷(benzoylpaeoniflorin)和 五没食子酸葡萄糖苷(1，2，3，4，6-Penta—O—galloyl—beta—d—glucose．PGG)IS]。吴少华 等从丹皮中分离 出白桦脂酸(betulinieacid)、白桦脂醇(betulin)、齐墩果酸 (oleanolicacid)、6一羟基香豆素 (6-hydroxyeou— maHn)和没食子酸(gallicacid)等。 指纹图谱是一种对中药整体化学特征进行表征的重要方法 】，而液相色谱与串联质谱联用技术 (LC／MS／MS)能够提供的丰富化学信息，已广泛应用于中药色谱指纹图谱指纹峰的结构鉴定 。本 实验研究了丹皮药材的HPLC指纹图谱，并通过LC／MS／MS鉴别了主要指纹峰的化学结构。其中有部 分成分在芍药属的其他植物中有报道 而尚未见于丹皮药材的报道，对进一步开展丹皮药材的化学研 究有重要的参考价值。 2 实验部分 2．1 仪器、试剂与材料 液相色谱／质谱联用仪为Agilent1100HPLC／MSDTrap(包括G1312A二元泵；G13158二极管阵列 检测器；vL型离子阱质谱仪)。色谱纯乙腈 (Fisher公司)，分析纯甲酸，自制二次蒸馏水。丹皮酚、没食 子酸、芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所)。安徽、四川、山东和山西丹皮药材；丹皮饮片 (北京市 同仁堂药店)。 2．2 实验方法 2．2．1 色谱条件 色谱柱：AltimaC 分析柱(4．6filmX250mm，5 m)；流动相：0．4％甲酸水溶液 (A相)一乙腈(B相)；梯度洗脱，时间程序如下：0min 0min 0min，乙腈(B相)0％ 0％--*85％； 检测波长：254nm，流速：1．0mL／min，进样量20ixL；柱温为室温。 2．2．2 质谱条件 电喷雾离子化源，分别以正、负离子模式检测；雾化气压力：0．175Mpa，干燥气流速： 8．0L／min；干燥气温度：350℃；毛细管电压：3500V；采用全扫描方式，扫描范围m／z100—1500。 2．2．3 样品处理 将不同产地的丹皮药材粉碎后过0．45m／ll孑L径筛 ，分别精密称取药材粉末2．5g， 加入250mL二次水，回流60min后，过滤，滤液用250mL的容量瓶定容；进样前用0．2 滤膜过滤。 2004．12-30收稿；2005-06-21接受 本文系国家自然基金重点项 目(No．9020905)和科技部 “十五”攻关项 目(N0．2002BA90629-3)资助